人血涂片的制作
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血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
涂片法制片是
生物
显微制片的基本方法之一。
步骤:
可分5个步骤进行
消毒→取血→推片→染色→观察
消毒与取血
消毒
先按摩取血部位,使血流通畅;再用酒精消毒采血针和取血部位(如指尖)。
取血
待酒精干后,刺破皮肤,使血自然流出,勿挤。取干净载片,让血滴在离载片一端中4~5毫米处,注意手指
持握载片的边缘,勿触及其表面。不能使载片接触取血部位的皮肤。
推片
取一块边缘光滑的载片做推片。将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°~40°角,向另一端平稳地推出,如右图所示。涂片推好后,迅速在空气中摇,使之自然干燥。
染色
用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。再将瑞氏染液(伊红-亚甲基蓝)滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染半分钟。加等量
蒸馏
水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用
蒸馏
水把染液冲掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察。
观察
红细胞
淡红色,无核的圆形细胞,因红细胞为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微米。
颗粒白细胞
嗜中性颗粒白细胞:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1-5叶。直径10-12微米。
嗜酸性颗粒白细胞:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色。直径10-15微米。
嗜碱性颗粒白细胞:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少,核1-2叶,染成淡蓝色。直径10-11微米。