实验性细胞移植：临床前及临床研究
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人们曾以极大的努力来开展细胞移植以修复心脏和血管组织，但仍有许多问题尚待解答。还需要实验研究方面的进一步实验，需要仔细评估临床工作。本单元交流了这两方面的探讨。
（一）K Pinkornell报告从切下的皮下脂肪选择干细胞。细胞通过培养方法选择，可以在标准条件下生长。比较直接分离出来后的基线状态和培养30天之后的基因表达。基因表达分析集中于肌节（Sarcomeric）基因和与心脏有关的转录因子。分析表明TnT、Titin：MLC2a，MLC2v NKX2.5和GATA4等基因，在7天后已有表达。免疫细胞化学检查发现少数表达Titin和肌钙蛋白的细胞有些肌节组成。这些细胞转染了eGFP，注射入缺血再灌注猪模型。早期资料提示GFP（用抗体检查出来）和肌钙蛋白一同表达。资料是初步的，但在细胞移植后有保全心壁厚度的趋向。如果还没有十分的说服力的话，提示干细胞注射的有益效应，甚至可能有新心肌细胞形成。但从结果看是有前途的，需要进一步、更广泛的继续观察。
（二）N Werner（法）报告试图识别出对再内皮化最重要的细胞。从脾分离出单核细胞，根据 膜蛋白 CDIIb的表达选择。比较CDIIb+及CDb-两种细胞组分与内皮祖细胞阻止内膜形成的潜能。体内实验用颈动脉剥脱形成的血管损伤模型。治疗为注射106个细胞共2次（相隔24小时）。7天后评估结果，首次研究表明，用未经选择的单核细胞阻止新生内膜形成优于CDIIb-或安慰剂。第二项分析比较内皮祖细胞、单核细胞和CDIIb组分，反映单核细胞注射有很强效应，CDIIb+细胞和内皮祖细胞稍有效应。上述结果提示，最佳内皮内生长过程中，各种不同的未分化细胞均必不可少。
（三）Muller-Ehmsen用实时PCR方法和大鼠梗死模型检查移植单核细胞和间充质干细胞的生存情况。接受移植者为雌性大鼠，供者为雄性大鼠。实时PCR检出基于Y染色体的识别。细胞注射入疤痕和心肌梗死的边缘区进行多种比较，包括细胞数（105，106和缺血损伤后的日数），结果反映注射后数小时内干细胞生存率高（35%），但6周后很快降低至极低（±1%）。单核细胞和中膜干细胞的资料相近似。细胞数增加并不改变生存组分，但增加（按逻辑）绝对数。随后较迟的注射，生存情况差。用胎盘-生成生长因子孵育细胞，防止凋亡，对生存率无大作用，这些都是分析干细胞生存情况的较为过硬的方法，这些结果十分持重、冷静，它迫使我们重审一些注射干细胞临床试验报告的阳性结果的解释。
（四）Seger（比）报告离体研究微循环内皮细胞和间充质干细胞之间的相互作用的结果。TNF-1使细胞粘附，用VCAM处理两种细胞能阻断这种粘附。TNF-处理两种细胞亦能亦生成VCAM，值得注意。加服Fluvastatin和舒降之亦阻断这些细胞型之间的相互作用。
（五）T Siminiak（波兰）报告的人体研究，值得注意。他用III-indium-oxinate标记CD34+干细胞。注射细胞入心梗后病人的梗死相关动脉。影像结果反映标记细胞10mg于心脏（1-10%），脾及肝（3-17%），所注射细胞活性的50%以上不能重现。这是在体内目察人干细胞重要的一步。
（六）W Wojakowski心肌梗死后 细胞因子 释放的自然情况和干细胞的动员收集56例AMI病人和39例稳定性心绞痛病人的资料，心梗后干细胞开始动员，入院时达峰值。SDF-1的释放与之相近似。有年青（意外地）、LV功能不良、以前有过MI史，NT-proBNP和TnI水平高等因子者干细胞数少，值得注意，干细胞或 细胞因子 何时干预最妥？这是今后这方面的一项关键性研究。
总之，这是一次十分扎实的交流，学术性极强，几位报告者从不同角度说明这一领域正通过世界各国间协作而前进。这些资料对干细胞研究前进至新水平极其重要，因为它们辨识着细胞移植治疗中的“可行”和“不可行”。
（P. Doevendans（荷）整理；余国膺 译）
（一）K Pinkornell报告从切下的皮下脂肪选择干细胞。细胞通过培养方法选择，可以在标准条件下生长。比较直接分离出来后的基线状态和培养30天之后的基因表达。基因表达分析集中于肌节（Sarcomeric）基因和与心脏有关的转录因子。分析表明TnT、Titin：MLC2a，MLC2v NKX2.5和GATA4等基因，在7天后已有表达。免疫细胞化学检查发现少数表达Titin和肌钙蛋白的细胞有些肌节组成。这些细胞转染了eGFP，注射入缺血再灌注猪模型。早期资料提示GFP（用抗体检查出来）和肌钙蛋白一同表达。资料是初步的，但在细胞移植后有保全心壁厚度的趋向。如果还没有十分的说服力的话，提示干细胞注射的有益效应，甚至可能有新心肌细胞形成。但从结果看是有前途的，需要进一步、更广泛的继续观察。
（二）N Werner（法）报告试图识别出对再内皮化最重要的细胞。从脾分离出单核细胞，根据 膜蛋白 CDIIb的表达选择。比较CDIIb+及CDb-两种细胞组分与内皮祖细胞阻止内膜形成的潜能。体内实验用颈动脉剥脱形成的血管损伤模型。治疗为注射106个细胞共2次（相隔24小时）。7天后评估结果，首次研究表明，用未经选择的单核细胞阻止新生内膜形成优于CDIIb-或安慰剂。第二项分析比较内皮祖细胞、单核细胞和CDIIb组分，反映单核细胞注射有很强效应，CDIIb+细胞和内皮祖细胞稍有效应。上述结果提示，最佳内皮内生长过程中，各种不同的未分化细胞均必不可少。
（三）Muller-Ehmsen用实时PCR方法和大鼠梗死模型检查移植单核细胞和间充质干细胞的生存情况。接受移植者为雌性大鼠，供者为雄性大鼠。实时PCR检出基于Y染色体的识别。细胞注射入疤痕和心肌梗死的边缘区进行多种比较，包括细胞数（105，106和缺血损伤后的日数），结果反映注射后数小时内干细胞生存率高（35%），但6周后很快降低至极低（±1%）。单核细胞和中膜干细胞的资料相近似。细胞数增加并不改变生存组分，但增加（按逻辑）绝对数。随后较迟的注射，生存情况差。用胎盘-生成生长因子孵育细胞，防止凋亡，对生存率无大作用，这些都是分析干细胞生存情况的较为过硬的方法，这些结果十分持重、冷静，它迫使我们重审一些注射干细胞临床试验报告的阳性结果的解释。
（四）Seger（比）报告离体研究微循环内皮细胞和间充质干细胞之间的相互作用的结果。TNF-1使细胞粘附，用VCAM处理两种细胞能阻断这种粘附。TNF-处理两种细胞亦能亦生成VCAM，值得注意。加服Fluvastatin和舒降之亦阻断这些细胞型之间的相互作用。
（五）T Siminiak（波兰）报告的人体研究，值得注意。他用III-indium-oxinate标记CD34+干细胞。注射细胞入心梗后病人的梗死相关动脉。影像结果反映标记细胞10mg于心脏（1-10%），脾及肝（3-17%），所注射细胞活性的50%以上不能重现。这是在体内目察人干细胞重要的一步。
（六）W Wojakowski心肌梗死后 细胞因子 释放的自然情况和干细胞的动员收集56例AMI病人和39例稳定性心绞痛病人的资料，心梗后干细胞开始动员，入院时达峰值。SDF-1的释放与之相近似。有年青（意外地）、LV功能不良、以前有过MI史，NT-proBNP和TnI水平高等因子者干细胞数少，值得注意，干细胞或 细胞因子 何时干预最妥？这是今后这方面的一项关键性研究。
总之，这是一次十分扎实的交流，学术性极强，几位报告者从不同角度说明这一领域正通过世界各国间协作而前进。这些资料对干细胞研究前进至新水平极其重要，因为它们辨识着细胞移植治疗中的“可行”和“不可行”。
（P. Doevendans（荷）整理；余国膺 译）
