抗体片段及其衍生形式
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抗体片段及其衍生形式
1.双特异性抗体 将两套轻链、重链基因导入骨髓瘤细胞中,选择合适的抗体恒定区及Ig类型,可获得产量大、均一性和高纯度的双特异性抗体。另外,以化学交联技术或杂交―杂交瘤技术也可获得双特异性抗体。
2.Fab抗体 Fab抗体是由重链Fd(即VM+CHl)和完整轻链通过二硫键结合而成的异二聚体,仅含一个抗原结合部位。将重链Fd和完整轻链的编码基因连接,5, 端融合细菌蛋白信号肽基因可在大肠杆菌内分泌型表达,形成完整的立体折叠和链内、链间二硫键,保持Fab片段的功能。
3.Fv抗体 其制备原理是:分别构建含VH和VL基因的载体,共转染细胞,使之分别表达并组装成功能性Fv抗体;或在载体中的VH和VL之间设置终止密码,分别表达两个小分子片段,再通过非共价键结合而形成Fv。
4.单链抗体 其制备原理为:用适当的寡核苷酸接头(1inker)连接轻链和重链可变区基因,使之表达单一的多肽链而形成单链抗体(single chain fragment variable,ScFv)。多肽链能自发折叠成天然构象,保持Fv的特异性和亲和力。
5.单域抗体 制备原理为,将抗体重链V区通过基因工程方法表达,获得仅含VH片段的抗体。单域抗体(single domain antibody)与抗原结合的能力及其稳定性,与完全抗体基本一致。
6.最小识别单位(minimal recognition units,MRU) 仅含可变区中单一CDR结构,分子质量仅为完整抗体的l%左右,但可结合相应抗原。