制备多克隆抗体抗原的准备和免疫原的注射剂量

互联网2010-12-02

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制备多克隆抗体抗原的准备和免疫原的注射剂量

抗原的种类繁多，包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成肽抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫动物动物具有不同的特殊性。一般的完全抗原免疫动物需加用佐剂，合成肽抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物，方可获得理想的免疫效果。

免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于细胞免疫的剂量，每次用于免疫羊的细胞数一般不低于1´10⁸ ；免疫兔的细胞数不低于1´10⁷ ；免疫小鼠的细胞数不低于1´10⁶ 。为了增强免疫反应，可以将佐剂注射在接种抗原部位的附近或对侧，或者先注射佐剂，再注射抗原。避免在细胞抗原中混合佐剂，以免破坏细胞，释放大量的胞质和胞核抗原，从而影响细胞膜抗原的免疫效果。对于纯可溶性抗原的免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次；大鼠为100μg～200μg/次；兔为100μg～1mg/次，合成免疫原为2mg(半抗原约为20～200μg)，一般需要与等量福氏完全佐剂混合。加强免疫的剂量为首次剂量的1/2，通常用不完全福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法；反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。