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介绍细胞过孔分析仪(图)

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测量红细胞的变形性是临床血液流变学的一项重要指标,最常用的测量方法是微孔滤膜筛滤法和激光衍射法。这些方法测出的是大量红细胞的平均结果。但是,在微循环中即使只有2~3%的红细胞变形性很差,也会严重影响红细胞通过毛细血管的流动。早在80年代中期,国际血液学标准化委员会血液流变学专家组“关于血液粘度及红细胞变形性测定的指导意见”中就指出:“这种少数的异常细胞对于体内血液有不成比例的作用,它在体外孔道滤过实验中也可能对结果有决定性的影响。为了研究红细胞变形性的这一方面问题,有必要发展相应的仪器。

单个或少量红细胞的变形性可用微吸管法或单孔过滤法来测量,但是这些方法测量的红细胞数目太少,操作太慢,无法给出足够多的数据供统计分析之用,所以大多局限于实验室从事基础研究之用,无法用于临床检测。为了克服这一缺点,80年代末美国和法国的一些科学工作者发明了“细胞过孔分析仪”(Cell Transit Analyser,简称CTA),它可以在大约1分钟内分析大约2000个红细胞通过膜孔时间的分布。随后这一仪器由法国Montpellierr的ABX公司制成商品,并在90年代初通过改进软件设计得到完善。下面就对这一仪器的工作原理和性能加以介绍。

仪器的工作原理

细胞过孔分析仪的构造如图1所示。滤膜由聚碳酸酌材料制成,含有约30个孔(孔直径D有5.0μm和4.5μm两种,孔长度L介于11μm和21μm之间,尺寸公差都在±0.1μm范围)。红细胞悬浮液很稀薄(压积H=0.04%,即每毫升含5xl04个红细胞),在压差△P作用下通过滤膜。滤膜两侧的电极连接电导测量仪(在100KHz交流电下运行),当细胞通过膜孔时电导值变低,记录下如图2所示的电信号.这些电信号全部由计算机记录,随后算出每一细胞的过孔时间γ,并用直方图形式给出过孔时间的分布和平均过孔时间<γ>(图3)。图2和图3中A组的膜孔较短(L=11μm),红细胞刚刚完全入孔就开始在另一端出孔,所以图2(A)的电信号较狭窄陡峭,而B组的膜孔较长(L=21μm),红细胞入孔后有一段时间完全在孔内,所以图2(B)的电信号较宽阔,而且有一小段平台状。图3(A)和(B)的<γ>值也有差别。由图3还可以看出,γ的分布是非对称的,平均值<γ>偏于时间较短的一侧。

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