紫外吸收法对过氧化氢酶活性的测定
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实验原理
H2 O2 在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240 )随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。
实验试剂
0.2mol/L pH7.8磷酸缓冲液(内含1%聚乙烯吡咯烷酮);
0.1mol/L H2 O2 (用0.1mol/L高锰酸钾标定)。
实验设备
紫外分光光度计;离心机;研钵;250ml容量瓶1个;0.5ml刻度吸管2支,2ml刻度吸管1支;10ml试管3支;恒温水浴。
实验步骤
2. 测定:取10ml试管3支,其中2支为样品测定管,1支为空白管,按表顺序加入试剂。
以1min内A240 减少0.1的酶量为1个酶活单位(u)。
注意事项