进样器、色谱柱相关知识

进样器

　　进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，分手动和自动两种方式。
　　
　　进样器要求密封性好，死体积小，重复性好，进样时引起色谱系统的压力和流量波动要很小。现在的液相色谱仪所采用的手动进样器几乎都是耐高压、重复性好和操作方便的六通阀进样器，其原理与气相色谱中所介绍的相同。

色谱柱

1. 色谱柱的构成

2. 色谱柱的填充

3. 填料的结构

　　　1. 色谱柱的构成
　　
　　色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。

　　色谱填料： 经过制备处理后，用于填充色谱柱的物质颗粒，通常是5-10粒径的球形颗粒。

　　色谱柱管： 内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm，长250mm。

　　色谱柱： 也称固定相，是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的,其结构如图8-8所示。

　　2. 色谱柱的填充
　　
　　干法填充： 在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直台面墩10-20次。

　　湿法填充： 又称淤浆填充法，使用专门的填充装置（图8-9）。

　　3. 填料的结构
　　
　　色谱填料是由基质和功能层两部分构成。

　　基质： 又常称作载体或担体，通常制备成数微米至数十微米粒径的球形颗粒，它具有一定的刚性，能承受一定的压力，对分离不起明显的作用，只是作为功能基团的载体。常用来作基质的有硅胶和有机高分子聚合物微球。

　　功能层： 是通过化学或物理的方法固定在基质表面的、对样品分子的保留起实质作用的有机分子或功能团。如图8-10是硅胶基质的冠醚大分子固定相的结构示意图，功能层冠醚分子吸附或键合在硅胶基质的表面。

　　填料的物理结构： 分为微孔型（或凝胶型）、大孔型（全多孔型）、薄壳型和表面多孔型四种类型，如图8-11所示。