双波长薄层扫描法测定泻胆丸中龙胆苦苷的含量

摘要：目的：用薄层扫描法测定泻胆丸中龙胆苦苷的含量。方法：采用双波长反射法锯齿扫描测定．测定波长λs=495nm，参比波长λR=600nm，以氯仿-甲醇-水(10：6：1)为展开剂．展距9cm。结果：点样量在2.O6～10.30 μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98.2O％，RSD 为3.31％( n=5)。结论：该法简便、快速、准确度高，适用于该产品的质量控制。
关键词：泻胆丸； 薄层扫描法； 龙胆苦苷
Determination of Gentiopicroside in Xiedan Pill by TLCS
ZH0NG Qiang，XIE Jiao，PAN Hong
Abstract：Objective：To determine the contents of gentiopicroside in Xiedan Pill by TLCS．Methods：The dual wavelength reflection zigzag scanning was employed in this determination，and a mixed solvent of CHCl3-MeOH-H2O(10：6：1)was used as the developer．The scanning was performed at λs495 nm andλR 600nm．The developing distance was 9 m．Results：The experiment gave a linear concentration range of 2.O6～10.30μg．The average recovery of this method was 98.20% andRSD 3.31%(n=5)．Conclusion：This method is relatively simple，fast and accurate．It is suitable for the quality of the preparation．
Key words：Xiedan Pill； TLCS； Gentiopicroside
泻胆丸由龙胆、栀子、黄连、黄柏组成。具有清热解毒、泻肝胆实火之功效，临床主要用于胆囊炎、肝炎等症．疗效确切。龙胆为方中君药，具有利胆、抗炎、健胃、降压等作用。龙胆中主含环烯醚萜苷类成分，龙胆苦苷为其中主要有效成分。为了更好地控制该制剂的质量，笔者采用薄层扫描，建立了泻胆丸中龙胆苦苷的含量测定方法。现将结果报道如下。
1 仪器与试药
CS-930型薄层扫描仪(日本岛津公司)；HHB-360型电热恒温干燥箱(上海跃进医疗器械厂)；TG328A 型电光分析天平(上海天平仪器厂)；薄层层析硅胶G(青岛海洋化工厂)；龙胆苦苷对照品(中国药品生物制品检定所)；所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 薄层色谱条件 硅胶G板，llO℃活化30min；展开剂：氯仿-甲醇-水(10：6：1)；显色剂：l0%硫酸-乙醇喷雾显色．105℃烘烤l5min显色。
2．2 薄层扫描条件双波长锯齿扫描：测定波长λs=495nm．参比波长λR=600nm；狭缝1.2mm×1.2mm；线性化参数Sx=3。
2．3 对照品溶液的制备 精密称取龙胆苦苷对照品20.6mg．置l0ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成lml含2.06mg的对照品溶液。
2．4 供试品溶液的制备 取本品2O粒，研细，过6O目筛．精密称取样品约l0g．置索氏提取器中，加l00ml甲醇回流至无色，提取液水浴蒸干．残渣加3Oml水溶解．加正丁醇萃取4次(30．15．15．15m1)，合并萃取液，水浴蒸干，用甲醇溶解并定容于5ml的容量瓶中。
2．5 标准曲线的绘制 用定量毛细管精密吸取对照品溶液1．2，3．4．5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开．按上述扫描条件测定，记录峰面积。以点样量(μg)为横坐标．峰面积为纵坐标，得龙胆苦苷在此条件下的标准曲线，回归方程为Y=1993.23十8386.96X，对照品在2.O6～10.30μg范围内线性关系良好(r=0.9992)。
2．6 同板及异板精密度试验 精密吸取同一浓度的对照品溶液2μ1．分别点于同一薄层板及不同的薄层板上，各点样5次(n=5)，依法展开．显色，测定峰面积．测得同板峰面积的RSD=2.65％．异板峰面积的RSD=3.21％ 。
2．7 稳定性试验 精密吸取一定浓度的供试品溶液3μl，点于薄层板上．依法展开，显色，测定峰面积．每隔l5min扫描1次。结果表明，供试品在2h内稳定，其峰面积的RSD=1.12％。
2．8 加样回收率的测定精密称取已知含量的泻胆丸粉末约l0g，精密加入龙胆苦苷适量，依法提取并测定含量，计算回收率，共测定5次，平均回收率为98.2O％，RSD=3.3l％。
2．9 样品测定 精密吸取供试品溶液3μ1，对照品溶液2μ1，4μl，点于同一硅胶G薄层板上．按上述薄层色谱及扫描条件展开、测定．用外标两点法计算。
3 讨论
3．1 本文曾对样品的提取方法进行了考察，比较了索氏提取、超声提取、回流提取对提取效果的影响．结果表明，索氏提取较其他方法提取率高；对提取时间考察的结果表明，提取4h即可提取完全。
3．2 龙胆苦苷在薄层展开后应充分晾干．均匀地喷洒1O％硫酸-乙醇溶液，显色后应立即盖上同样大小的玻璃板．并在2h内完成测定，以保证测定结果的准确性。
参考文献：
[1] 沈映君．中药药理学[M]．北京：人民卫生出版社，2000：221―221．
[2] 江苏新医学院．中药大辞典，上册[M]．上海：上海人民出版社，1977：628―628