乙型肝炎表面抗原定性检测（HBsAg）操作规程
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1目的
测HBsAg主要是用于乙型肝炎的的诊断、招工体、征兵体、幼儿入学、献血员筛选、血液制品的复、了解乙肝病毒感染者的感染状况、疗效观察及预后评估，另外还用于乙型肝炎的流行病学调查。
2方法原理
采用ELISA双抗体夹心法，即酶联免疫吸附法，包被HBsA于琼脂微孔与标本中的HBsAg形成A-Ag复合物，再于酶标HBs抗体结合，加入TMB底物产生显色反应。
3性能指标
此方法快速简便、特异性强、测灵敏度度05ng/
4标本收集
41标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求--化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）;其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为测标本。
42标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清）,不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。
43标本保存：留取的标本最好在3小时内测，不能立即测的应放置于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发）,或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）
44标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管
45标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（05塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定点指定接收人。
46拒收标本：凡与41-45所述内容不符的标本，人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。
5分析系统
51分析仪器：为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪，仪器校准请参见仪器操作规程。
52分析试剂：为上海科华公司提供的配套的HBsAg试剂盒，规格为96test/盒，2-8℃贮存，有效期12个月；在效期内使用试剂。
53质控试剂：为上海公司提供的配套的HBsAg试剂盒中所附的阴、阳性对照，2-8℃贮存，有效期12个月每月一次质控小结，失控要有记录及纠正的结果。
6操作方法
61每孔加入待测标本50微升。
62每孔加入酶结合物1滴，充分混匀，封板，置37℃孵育30分钟。
63手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。
64每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37℃孵育才15分钟。
65每孔加入终止液1滴，混匀。
66用酶标仪读数，数值取波长450n（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630n）,先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
测HBsAg主要是用于乙型肝炎的的诊断、招工体、征兵体、幼儿入学、献血员筛选、血液制品的复、了解乙肝病毒感染者的感染状况、疗效观察及预后评估，另外还用于乙型肝炎的流行病学调查。
2方法原理
采用ELISA双抗体夹心法，即酶联免疫吸附法，包被HBsA于琼脂微孔与标本中的HBsAg形成A-Ag复合物，再于酶标HBs抗体结合，加入TMB底物产生显色反应。
3性能指标
此方法快速简便、特异性强、测灵敏度度05ng/
4标本收集
41标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求--化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）;其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为测标本。
42标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清）,不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。
43标本保存：留取的标本最好在3小时内测，不能立即测的应放置于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发）,或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）
44标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管
45标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（05塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定点指定接收人。
46拒收标本：凡与41-45所述内容不符的标本，人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。
5分析系统
51分析仪器：为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪，仪器校准请参见仪器操作规程。
52分析试剂：为上海科华公司提供的配套的HBsAg试剂盒，规格为96test/盒，2-8℃贮存，有效期12个月；在效期内使用试剂。
53质控试剂：为上海公司提供的配套的HBsAg试剂盒中所附的阴、阳性对照，2-8℃贮存，有效期12个月每月一次质控小结，失控要有记录及纠正的结果。
6操作方法
61每孔加入待测标本50微升。
62每孔加入酶结合物1滴，充分混匀，封板，置37℃孵育30分钟。
63手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。
64每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37℃孵育才15分钟。
65每孔加入终止液1滴，混匀。
66用酶标仪读数，数值取波长450n（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630n）,先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
