我国PT测定标准化和质量控制的方案
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我国PT测定标准化和质量控制的方案,供讨论。
一、原理
将凝血活酶(主要含组织因子和脂质)和钙离子,加到枸橼酸抗凝血浆中,在37℃保温,测定血浆凝固时间,即为PT.本法主要用于过筛检测外源凝血途径的第VII、II、V、X因子和相关因子的抑制物。
二、试剂
1、抗凝剂:109mmo1/L枸橼酸钠液(相当于含二分子结晶水的橼酸钠32g/L)
2、凝血活酶试剂:市售商品,应标有ISI、批号及有效期。冻干者应按说明书加指定的缓冲稀释剂复溶。
3、氯化钙(CaCl2)溶液,浓度为25mmo1/L。
(目前有些商品试剂已将凝血活酶液与氯化钙液混合好,可不必另配CaCl2液)
4、质控物,正常及异常对照血浆。
三、仪器
1、手工法:秒表,保持37℃±1℃的恒温水浴箱或电热块。
2、仪器法:各种自动或半自动凝血仪,严格按说明书操作。
四、血液样品的采集、运送及贮存
1、用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器。采血时止血带不可束缚过紧,并不应超过5分钟。(针管内见到血即应解开止血带)否则某些凝血及纤溶因子会活化,并可能使Hct长高。
2、血与枸橼酸钠抗凝剂按9:1混合,轻轻颠倒混匀。可用特制的已加有定量枸橼酸钠液的抽空硅化管(国内已大量生产)采血,可保证血与枸橼酸钠比例准确,防止凝血因子活化,并保持清洁,防止试管和不合格橡皮塞的污染。