重视临床检验标本采集和处理

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    临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。为做到临床检验质量保证，中华人民共和国卫生部卫生技术标准化委员会已将临床检验标本采集和处理的有关问题，列为国家和行业的标准化文件，以达到对临床检验工作的规范化要求。如中华人民共和国卫生行业标准WS/T225-2002�WS/T226-2002�WS/T220-2002�WS/T229-2002�WS/T223-2002�WS/T222-2002�WS/T230-2002和中华人民共和国国家标准GB 19489-2004等，分别对临床化学检验标本�变携式血糖仪血标本�凝血因子测定标本�尿液标本�乙型肝炎表面抗原酶免疫检测标本�临床酶活性浓度测定标本�临床诊断中聚合酶链反应标本和实验室生物安全等标本均提出了标准化的要求。
    一、必须十分重视临床检验标本采集和处理
    实践证明，为保证临床检验质量，必须做到全过程质量控制，即对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括：实验前（分析前）�实验中（分析中）和实验后（分析后）三个阶段的质量控制，其中实验前质量控制尤其重要。国内外均有报道，实验误差中60～70%来自实验前（分析前），而且实验前（分析前）误差是仪器�试剂�质控品和标准品等再好无法解决的。因此，必须注意做好实验前质量管理。实验前质量控制主要包括：①病人准备；②标本收集；③标本储存 ；④标本运送；⑤标本处理等。
    1.病人准备
标本采集前病人的状态对检测结果会有一定的影响，因此，各种不同检测项目对标本
采集前病人的状态有不同的要求。如：血脂测定须病人禁食12-14h后采血（否则出现脂血）；情绪紧张会使血糖升高；吗啡、可待因可使淀粉酶（AMS）升高；吃香蕉能使尿液5-羟吲哚乙酸升高等。所以，在病人要做某些化验检查之前，必须嘱咐病人做好相应的准备。2.标本采集

临床检验标本中血、尿标本占95% 以上。收集标本应注意：
（1）避免干扰物污染（特别是定量分析标本）；
（2）采血部位和方法要正确；
（3）标本标记定要无误；
（4）无人为的溶血和混浊（收集标本用力震荡或用玻璃棒及木棍搅拌会导致溶血，餐
后采血会出现脂血而混浊）；
（5）合理使用抗凝剂及防腐剂；
（6）收集区温度最好不超过20OC；
（7）标本采集后要尽快送至实验室。
3.标本运送1）标本由临床运送至实验室要尽可能快，必要时可分离出血清（浆）后运送；
（2）标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染（标本管要盖盖子）；
（3）有特殊要求的标本要按特殊要求运送（如血气分析标本应严格密封，与外界空气隔绝；测定VA、VB6、ß-胡萝卜素、胆红素等标本，应应注意避免暴露于光线下，用黑纸或铝箔保护标本）；
（4）关于自动化运送（物流）系统（真空采血管；运送车；气运；人工运送等物流系统），应注意保证对实验结果无影响（保证红细胞膜完整性）。红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有：LDH、K、Hb、ACP；有值得注意的影响的项目主要有：Fe、ALT、T4；有轻微影响或不太受影响的项目主要有：TP、ALB�ALP、AST�TBiL�WBC、APTT、TT�Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。

 

4.标本送出及签收
临床人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接受临床标本，均应按标准化要求进行，并且一定要做到认真核对。包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等，标本送出人员和标本接受人员都要做认真的记录并签字。
5.实验室标本处理
实验室接受标本后应及时正确地予以处理，否则会影响检测结果的准确性。如：血糖标本不及时处理，会因糖酵解作用引起测定结果降低（室温下每小时降低7%，即使在真空采血管中在较低温下也每小时降低1.9%）；酸性磷酸酶测定血标本应尽快分离血清并立即测定，否则测定结果会很快降低(室温放置1-2h测定结果降低50%)；电解质测定血标本应及时分离血清和血浆(尤其血钾测定时)否则血钾测定结果可能增高；血氨和血气分析不仅标本要按规范化要求采集，而且标本送检后一定要及时检测。
实验室接受标本后的处理应注意以下事项：（1）时间：实验室接受标本后应尽快予以分类和离心。①促凝标本采血后5-15min尽早处理；②抗凝标本可采血后立即离心；③非抗凝（无促凝）标本采血30-60min后离心；
④抗凝全血标本（测Li、Zn、原卟啉、原孢菌素）可以不离心。
（2）温度：一般标本为室温（最好是22-25ºC）放置；冷藏标本（对温度依赖性分析物）应保持2-8ºC直到温度控制离心。（3）采血管放置：应管口（盖管塞）向上，保持垂直立位放置。

 

（4）采血管必须封口：管塞移去后会使血PH改变，影响结果，如可使PH、Ca2+增高，使ACP减低；封口可以减少污染、蒸发、喷溅和溢出等。关于实验室标本拒收规定
主任及有关负责人签字同意并有下列情况时可考虑标本拒收（应注意与临床沟通）：
（1）标本属性不清(标记错误或无标记，标本标记与申请单标记不符等)；
（2）采血量不足(或血量与抗凝剂等比例错误)；
（3）标本收集管使用错误。如：PT、APTT、FBG、TT、DD应使用枸橼酸钠抗凝管，CK、电解质、血气、氨基糖苷应使用肝素锂抗凝管，否则是错误的；K+、Na+、Ca2+可用非抗凝血，使用草酸钾、草酸钠抗凝是错误的；血NH3和含氮物质测定用草酸氨抗凝是错误的；血细胞分析仪测定必须用EDTA-3Na、EDTA-2K抗凝；
（4）人为因素所致的标本溶血；
（5）标本运输不当(该冷藏而未冷藏的标本)。
二�临床常用检验项目的标本采集和处理
（一）血常规检验标本
一般用EDTA-2K（EDTA-K2-2H2O）1.5～2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管）采血。采血注意事项为：
1. 采血后立即上下颠倒混匀（5-10次，不可用力震荡）；
2. 应按抗凝管刻度准确采血至2ml；3. 采血后应尽快送检（需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2h WBC形态会发生改变）。
（二）红细胞沉降率（血沉， ESR）测定标本
静脉采集枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06g/L）抗凝血（枸橼酸钠抗凝管采血）。注意事项：
1.采血后立即上下颠倒混合5-10次；
2.单独采1管血,准确采血至2ml（抗凝剂：全血 = 0.4 ：1.6）；
3.采血后应尽快送检（必须2h内检测）。
（三）凝血检测（ PT、APTT 、 TT 、 FBG 、 DD ）标本
静脉采集抗凝血（最好真空负压系统采血），抗凝剂用枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06g/L,抗凝剂:全血 = 0.2：1.8 ）。采血注意事项：
1.空腹采静脉血（餐后脂血影响检测结果，使因子Ⅶ活化，导致PT延长）；
2.采血时患者应保持平静状态30min以上（剧烈活动可使因子Ⅷ活化，APTT明显缩短）；
3.应单独1管血；
4.必须准确采血至刻度线2.0ml； 

 

5.采血后应立即上下颠倒混匀5-10次，不可有凝块；
6.采血后应尽快送检（必须2h内检测）。
（四）血型 与 血交叉标本
为EDTA-2K抗凝血。采血注意事项：
1.最好血型与血交叉各采1管血（要求保留血样）；
2.采血量分别为1.0ml和1.0～2.0ml；
3.采血后立即上下颠倒混匀（5～10次）。
尿液常规检查标本
１.尿液常规检查标本应按以下原则进行采集：
(1)新鲜晨尿最佳，门诊病人亦可留随机尿；
(2)尿液采集于干净带盖容器中，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿；
(3)避免混有经血、白带、精液和粪便；
（4）尿液标本冰箱可保存6～8h，但细胞等有型成分会有破坏，会有结晶析出；
（5）尿液成分定量检查应留取24h防腐混合尿100～200ml（须记取24h尿液总量）；
（6）根据不同检测目的选择不同的防腐剂：临床最多用的尿液防腐剂为①甲醛（formalin），用于尿液有形成分检查，浓度为400mg/L尿液即40%；②甲苯（toluene），常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性或定量检查，5-20ml/L尿液；③浓盐酸（hydrochloric　ａｃｉｄ），用于定量测定尿１７－羟、１７－酮、肾上腺素、儿茶酚胺和尿钙等，浓度为１ｍｌ/L尿液。

 

２.尿液常规检查标本采集方法：
（１）晨尿最好（安静状态下留取清晨第一次尿，浓缩，无其他影响）；
（２）随机尿较常用（随时留尿，适用于门诊和急诊病人，结果易受多种因素影响）；
（３）清洁尿（中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿，用于病原微生物学培养、坚定和药敏）；
（４）24h尿（用于尿液成分24h定量检查分析，一定要教会病人留取24h尿正确方法）。
（５）３ｈ、１２ｈ等计时尿和餐后尿等特殊实验尿，则应按医嘱要求进行留尿。

 

（六）粪便常规检查标本
1.一般应为新鲜的自然排出的粪便３～５ｇ，必要时可肛拭子采取；
2. 送检粪便应盛于洁净带盖的塑料盒中送检，要做好标记；
3.要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查，表面无异常时应从粪便表面、深处及粪端多处取材；
4.检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前，于肛门周围皱襞处拭取标本，并立即送检；
5.检查血吸虫卵时应取黏液、脓、血部分，如须孵化毛蚴应留取不少于30g的粪便，并尽快送检，必要时留取整份粪便送检。
6.检查痢疾阿米巴滋养体时，应床边留取新排出的粪便，从脓血和稀软部分取材，并立即保温送实验室，并且实验室接受标本后应立即进行检查。
7.做便隐血试验时，应嘱病人检查前3d内禁食肉类、含动物血的食物及某些蔬菜，禁服铁剂和维生素C等对实验有干扰作用的药物。
浆膜腔积液检查标本
(1)浆膜腔积液标本一般由医生无菌穿刺采取；
(2)送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取２ml；细菌学检查用
无菌管采集标本，厌氧菌培养留取１ml，结核菌检查留取１０ml。

(3)标本采集后必须立即送检（否则可出现细胞变性，标本凝集，细菌溶解）；
(4)用于细胞学检查时，可在标本中加适量EDTA盐抗凝，但还须留取１管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性；化学检查标本宜用肝素抗凝。