四种检测红细胞血型IgG抗体方法的比较
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目前医院常规交叉配血一般用盐水法,但盐水交配不能检出免疫性IgG抗体,因而有输血反应的危险。而检测红细胞血型IgG抗体所用酶法,抗球蛋白法由于步骤多、时间长及试剂、仪器等因素不适合常规及急诊配血。Polybrene法(聚凝胺)能快速、灵敏地检测IgG抗体。现将上述四种检测IgG抗体的方法比较如下。
1 材料与方法
1.1 试剂 Polybrene试剂盒由东耀企业有限公司提供。
1.2 标本 共144份,取上海市内医院各种疑难血型标本,孕妇(有流产史及分娩新生儿溶血病患儿病史)、献血员Rh(-)标本。
1.3 方法
1.3.1 试管内加2滴血清(或血浆),加不规则抗体筛选用的3~5% RBC悬液2滴,加LIM液0.6 ml,室温静置1 min,加Polybrene液2滴,混匀室温静置15 s,离心弃上清液,再加“复悬液”2滴。直接看结果。
1.3.2 若检测阳性,则有IgG抗体存在,进一步检测抗体特异性及抗体效价,以观察Pulybrene法检测出IgG抗体特异性及敏感性的能力。
2 结果
2.1 本组实验标本144例,其中检测出抗D、抗cE、抗C、抗E等IgG抗体阳性标本8例,对其特异性用酶法,抗球蛋白法及Polybrene法进行红细胞谱抗原吸收放散试验,证实了抗体特异性,3种方法检测结果见表1。
表1 三种方法检测红细胞血型IgG抗体特异性比较
编号 | 酶法 | 抗球蛋白法 | Polybrene法 | 抗体特异性 |
1 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-cE |
2 | 4+ | 4+ | 4+ | 抗-D |
3 | 4+ | 4+ | 4+ | 抗-D |
4 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-c |
5 | 2+ | 2+ | 2+ | 抗-D |
6 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-E |
7 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-D |
8 | 2+ | 2+ | 2+ | 抗-E |
2.2 应用 3种方法对检出的8例特异性抗体进行效价测定,以证实用Polybrene法检出IgG抗体特异性强,敏感性高,见表2。
表2 检测红细胞血型IgG抗体敏感性比较
编号 | 盐水法 | 酶法 | 抗球蛋白法 | Polybrene法 |
1 | - | 64 | 64 | 64 |
2 | - | 256 | 256 | 256 |
3 | - | 256 | 256 | 256 |
4 | - | 32 | 32 | 64 |
5 | - | 4 | 8 | 8 |
6 | - | 64 | 64 | 64 |
7 | - | 128 | 128 | 256 |
8 | - | 8 | 8 | 16 |
2.3 Polybrene法对8例抗体检出者在反应温度、时间及操作步骤方面比较,证实该法比其他方法快速、简便并且正确无误。
3 讨论
目前,美、日及我国台湾地区IgG抗体筛选及交叉配血广泛应用Polybrene法。由于黄种人K-Ag(一种Kell血型抗原)几乎为零,出现抗K-Ab概率极小,可不予考虑抗K抗体的漏检。Polybrene法能检出IgG,IgM抗体所引起的配血不合,其方法简便快速可作为血库常规配血方法推广应用。