对《形态学检查方法的标准化及其在细菌鉴定中的作用》一文的商榷

互联网2015-01-05

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原作者:边泽源

中华<a target="_blank">检验医学</a>杂志2006年第10期刊登了谷海瀛教授的《<a target="_blank">形态学检查方法的标准化及其在细菌鉴定中的作用</a>》一文，读后深受启发，结合自己的工作实践，认为其中某些观点值得与作者商榷。

的确，形态学检查方法在<a target="_blank">细菌</a>鉴定中有重要作用，而不标准的形态学检查很容易产生“副作用”。规范一整套适合<a target="_blank">微生物</a>学自身特点、符合中国国情的<a target="_blank">细菌</a>形态学标准化操作很必要。作者原文革兰染色写得很精彩，从繁多影响结果准确性的因素中不难看出，细菌的形态学检查是最基本、最快速的，但却不是最简单的!操作者经验水平常常决定结果的准确程度。形态学检查偏重经验范畴，是要经过反复实践获得的知识，受个人素质的约束。所以搞好<a target="_blank">微生物</a>的关键是严肃认真、活学活用、举一反三，以理论指导实践，实践丰富理论。绝对的标准化，何其难也!

菌落的大小是细菌的关键特征之一。引文划定菌落大小以1 mm为界，有些欠妥!我们都知道，细菌菌落的大小与很多因素有关，其中培养基的营养成分起了不可忽视的作用。同样是血平板，同样的条件培养24 h，肺炎链球菌在以Oxoid的胰胨大豆琼脂为基础、加7％无菌羊血的新鲜平板上，不需CO2环境，生长的菌落直径就有约1 mm大小，脐窝明显，很容易和其他草绿链球菌区别；而我室原使用的某国产厂家的血琼脂基础加7％无菌羊血的新鲜血平板，肺炎链球菌和草绿链球菌都是“针尖大小”，从外观很难区别。因此，采用相对标准化，即在非选择培养基上，以营养要求不高的某种菌(例如金黄色葡萄球菌)同等的条件为参照，描述目的菌，这样同种细菌在特定的条件下，菌落大小就好描述。

标准化的内容应该有实质的参考菌，否则，哪个菌脆，哪个菌黏等内容也就不好说。因为，每个人的认知感受不同。就说铜绿假单胞菌的气味，我国教材称该菌具有生姜气味，而国外文献描述为葡萄水果气味。到底哪个更贴切?如果你在生姜成熟的季节，到生姜地里拔出一株，折断杆，你就发现此气味与铜绿假单胞菌的气味惊人的相似。当然，超市里的生姜是不再有那种气味的。需要严肃声明的是，最好不要利用气味鉴定细菌，不是<a target="_blank">生物安全</a>所允许的，特别是真菌更危险。其次，特定的气味不是细菌固有的，多是分解产物；培养基蛋白质等营养成分的改变，也在一定程度上影响细菌的气味，所以气味很难进行标准化。

关于菌落边缘问题，金黄色葡萄球菌没有动力，菌落边缘整齐，而铜绿假单胞菌有动力，边缘不整齐，由此可以推理，有动力的细菌，很可能出现边缘不整齐的情况，只是动力的强弱使边缘整齐的程度不一而已。但菌落边缘不整齐的原因不全是因为“动力”所致，细菌的特殊生长等也会影响菌落边缘的特征，结核分枝杆菌、丝状真菌、炭疽杆菌等就属于这方面的原因。

可见，细菌形态学检验标准化还有许多值得探讨的地方。以上仅是个人不成熟的见解，欢迎同道斧正。