沙门氏菌血清凝集试验的一点小心得
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前两天遇到一SS平板上可疑沙门氏菌,挑取到沙门氏显色平板上,为紫红色菌落,符合。挑双糖管K/A-及综合发酵管(葡萄糖+甘露醇+蔗糖-动力+产气+H2S+IND-尿素酶—),生化反应完全符合沙门氏。血清凝集A-F多价不凝集(或者说是极其微弱的凝集),常见的O1,O4,O9,O7(均为国产血清)均不凝集。想起疾控老师的经验:凝集不好的放室温(不要放冰箱)1到2天后可能凝集的要好些,综合发酵管1比双糖管的菌凝集更好,再不好传代后再凝集。放置一天后,A-F多价血清一分钟后可见凝集,比前一天凝集明显。因为我们这边的沙门氏流行株为鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,所以O一般先凝O4和O9。这次先用疾控老师送的泰国的O9血清,竟然一触即凝。再拿国内的血清O9凝集,1分钟后才见明显凝集。怎么会差别这么大呢?国产试剂叫我怎么爱你?继续凝集Hg,Hm凝集的都很好。应该为肠炎沙门氏菌(9:g,m:-)
由此一点小心得与大家分享:
1 沙门氏菌显色平板特异性比较强,一般来说如果颜色符合就是沙门氏菌,特别是如果生化反应再符合的可疑菌A-F多价血清最初不凝不要轻易放弃;
2 血清凝集不好的,可以将菌株放置在室温(不要放冰箱)24-48h后再做凝集或者再传代后凝集,可能有收获;
3 我有多次用国产血清凝集结果与疾控凝集结果(疾控用进口血清)不一致的经历。 国产的血清质量不够理想,如果条件许可可以购置进口血清(不过听说价格也贵的多),进口血清一般以泰国和丹麦血清为佳;
4 沙门氏菌凝集O凝集时根据本地流行株先行凝集可能会事半功倍;
5 最好同时备两个品牌的血清,哪怕两个品牌的均为国产的,有时会出现凝集不出的原因是因为血清原因,两套血清可以相互印证,尽量排除血清因素的误导;
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