肺炎链球菌微生物学检查

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肺炎链球菌为链球菌科的一种球状细菌�革兰氏染色阳性�常成对或成短链排列�故旧称肺炎双球菌(Diplococcus pneumoniae )。

 

 

无芽孢�无鞭毛�有明显荚膜。在血琼脂培养基中生长良好�菌落外围有绿色溶血带�在胆汁中溶解�对小鼠致病�可藉此与甲型溶血性链球菌鉴别。有荚膜的肺炎球菌形成光滑型菌落�毒力强�失去荚膜后变为粗糙型菌落�毒力降低或消失。

 

 

肺炎链球菌抵抗力不强�加热至52℃10分钟或阳光直射1小时即可杀死�对一般消毒药如石炭酸�高锰酸钾均较敏感�对干燥抵抗力较强�在干燥的痰中可生存1～2个月。

 

发病机理和病理

肺炎链球菌为正常人鼻咽部的常住菌�尤其在冬春季节�健康人鼻咽部常可培养出肺炎链球菌。

因正常人呼吸道有多种防止肺部感染的保护机制如咳嗽反射�纤毛运动�巨噬细胞吞噬作用等�故一般肺炎链球菌并不引起发病。仅当进入气道的细菌数量太大�或呼吸道正常防御功能遭受损害时才引起发病。

致病物质

 

 

（1）荚膜：是肺炎链球菌主要的致病因素。有荚膜的肺炎球菌可抵抗吞噬细胞的吞噬，有利于细菌在宿主体 内定居并繁殖。 

 

（2）肺炎链球菌溶血素：高浓度时对实验动物有致死性。对人的致病机制尚待确定。

 

 

（3）紫癜形成因子：注入家兔皮内，可产生紫癜及出血点并伴有 内脏出血。紫癜形成因子与人类肺炎球菌感染间的关系尚不明确。 

（4）神经氨酸酶：在新分离株中发现，能分解细胞膜糖蛋白和糖脂的N-乙酰神经氨酸，与肺炎链球菌在鼻咽部和支气管黏膜上定植、繁殖和扩散有关。

临床表现

约半数肺炎病例发病前有感冒症状�很快出现寒战�咳嗽�胸痛和血痰等症状。体温在数小时内上升至39～40℃�呈稽留热型(持续高热�24小时内温差<1℃)�常伴头痛�乏力和全身肌肉酸痛等症�60～80％患者因炎症波及胸膜而出现严重胸痛�胸痛随呼吸和咳嗽而加重�若病变在下叶�炎症波及横膈�可发生腹痛�甚至误诊为急腹症。

 

90％病例有咳嗽�初为干咳�继之咳少量黏液�以后呈脓性痰�约3/4病例痰中带血或呈铁锈色(渗出到肺泡内的红细胞破坏释出含铁血黄素混于痰中而致)。1/3成人或2/3儿童于病程早期有消化道症状如恶心�呕吐�腹胀�腹泻等。

 

 

肺炎链球菌脑膜炎为成人常见的化脓性脑膜炎�常继发于肺炎�中耳炎�乳突炎�鼻窦炎或颅脑损伤后�一部分病例无原发病灶可寻。半数以上病例伴有菌血症或败血症�病情大多危重�全身毒血症状明显�有头痛�发热�神志改变和颈强直与克尔尼格氏征�布鲁金斯基氏征阳性等脑膜刺激征。

 

 

诊断 对原因不明的突发寒战�高热伴呼吸道症状者应考虑肺炎链球菌肺炎的可能。X射线胸片检查常能明确诊断。痰涂片革兰氏染色见阳性成对球菌�痰�血液或脑脊液等体液细菌培养获肺炎链球菌则可确诊。

 

微生物学检查

 

 

1、标本根据感染部位不同采取不同标本，如痰液、脓液、血液、脑脊液等。

 

2、直接涂片镜检对痰、脓或脑脊液沉淀物标本，可涂片进行革兰染色镜检，若发现典型的成双排列、有荚膜的革兰阳性球菌，结合临床症状可做初步诊断。

 

3、分离培养与鉴定将痰或脓液直接接种于血琼脂平板上，37℃孵育24h后，挑选溶血的可疑菌落做进一步鉴定。血液及脑脊液先在血清肉汤培养基中增菌后，接种到血琼脂平板上分离培养并鉴定。

4、肺炎链球菌的鉴定主要应与甲型溶血性链球菌鉴别。其中以胆汁溶菌试验、菊糖发酵和奥普托辛试验最为常用。必要时可做小鼠毒力试验。在上述试验中，肺炎链球菌均为阳性，而 甲型溶血性链球菌为阴性。

5、肺炎链球菌型别鉴定

 

 

（1）荚膜肿胀试验：亦称为Quellug试验。新鲜标本悬液与等量不稀释的肺炎球菌分型诊断血清混合后，覆以盖玻片，油镜下观察。标本中肺炎球菌若与同型免疫血清相遇，荚膜将显著增大。 

 

 

（2）凝集试验：将可疑肺炎球菌与已知标准分型血清做玻片凝集试验，若细菌凝集成堆，为同型肺炎球菌。

预防

 

 

目前有的国家采用14价肺炎链球菌荚膜多糖体菌苗进行免疫预防�有效率为50～100％。对肺炎链球菌高风险人群如已行脾切除术者或2岁以上原有心�肾�肝或代谢病患者行菌苗接种时�相应类型的肺炎链球菌引起肺炎合并菌血症的发病率大约减少80％�故菌苗不失为保护患者免于肺炎链球菌感染的主要方法。