【求助】恳请推荐绿色荧光蛋白的真核表达载体
丁香园论坛
1094
各位高手：
小的新手上路，恳请各位不吝指导。小的想用带有绿色荧光蛋白的真核表达载体将一个长度在600-1000bp的cDNA和一段长度几十个bp的shRNA转染入人类的细胞中，希望目的基因能够比较稳定的表达，并且使得细胞能在激光共聚焦显微镜下显示绿色。能否恳请各位分别为推荐cDNA和shRNA各推荐一种比较常用的、可行性比较好的、不太容易发生意外情况的带有绿色荧光蛋白的真核表达载体呢？多谢各位了！
小的新手上路，恳请各位不吝指导。小的想用带有绿色荧光蛋白的真核表达载体将一个长度在600-1000bp的cDNA和一段长度几十个bp的shRNA转染入人类的细胞中，希望目的基因能够比较稳定的表达，并且使得细胞能在激光共聚焦显微镜下显示绿色。能否恳请各位分别为推荐cDNA和shRNA各推荐一种比较常用的、可行性比较好的、不太容易发生意外情况的带有绿色荧光蛋白的真核表达载体呢？多谢各位了！
pEGFP-N1
你用的什么细胞啊，要稳转，细胞系的话用逆转录病毒就可以，如pMSCV，不知道有没有GFP的 ，不过可以自己加GFP。如果是原代细胞的话感觉最好还是慢病毒，公司买现成的，自己做太麻烦
谢谢两位兄弟，质粒的载体就可以了。只是不知道表达出来的GFP是不是和目的基因连在一起的融合蛋白？融合入蛋白会不会影响原目的基因的性能？
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
