【求助】真心求助：关于克隆构建

最近在构建一个克隆，两个多月了都还没成功。具体情况如下：使用的是promega公司的Halotag载体，约3900kb。片段约500kb。酶切位点是SgfI 和 BamHI。之前用别人连了片段的载体酶切后再做载体的，无论怎么切都是自连。这次使用了公司的原始载体（带致死基因），片段也是从T载上切下来的，所以感觉载体和片段都切的没问题了，结果一个都没长（可能有自连的但是死了）。
引物，酶切位点什么的都检查过了没问题，实在是没办法了，在这真心求教各位分子方面的大师，给点建议吧。谢谢啦！！！

换个T4酶吧

检查一下要插入的片段的量吧

连接前有没有定量，跑个胶看看！如果这个没问题那就是连接酶有问题了

把载体片段和目的片段同时跑电泳，两者亮度相当，表示质量相当，这种情况下，摩尔浓度之比可以近似为碱基数之比的倒数。