【讨论】细胞凋亡 时 DNA 是双链同时断裂还是单链断裂?
丁香园论坛
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如题。。。
我看有些人说是断裂成200bp的片段,是否有人做过断裂时的长度特性?断裂点的偏好性?
我很迷茫,
如果是双链断裂 结构是怎么样的?是粘末端吗?多少碱基的粘末端?
如果是单链断裂,有什么特性?
还是两者都有?频率多少?
大家如果可以,发点文献给我看一下,谢谢!
我看有些人说是断裂成200bp的片段,是否有人做过断裂时的长度特性?断裂点的偏好性?
我很迷茫,
如果是双链断裂 结构是怎么样的?是粘末端吗?多少碱基的粘末端?
如果是单链断裂,有什么特性?
还是两者都有?频率多少?
大家如果可以,发点文献给我看一下,谢谢!
首先,断裂成200bp是指DNA高级结构中组蛋白小体内DNA是200bp左右长度。DNA包裹组蛋白,组成组蛋白小体,而组蛋白小体与组蛋白小体之间的DNA很容易被微球菌核酸酶降解,而后再通过蛋白酶K将组蛋白消化后,DNA跑Agarose电泳便是200bp长度左右。断裂点就是在组蛋白小体与小体之间。这是一个固定的实验,根据微球菌核酸酶的酶活及处理时间,在琼脂糖凝胶电泳中可以看到200bp成倍数出现的条带。
DNA损伤包括双链损伤和单链损伤两种,损伤没有特定的断裂点,也未必是粘性末端。引起DNA双链损伤的因素有很多,比如化学药物Etoposide是抑制拓扑异构酶活性的,而拓扑异构酶在DNA复制及修复过程中发挥活性需要靠DNA的断裂和重连,抑制其活性导致DNA断裂后无法重连。而射线也可以引起双链损伤比如γ射线,只能引起双链损伤而不引起单链损伤。单链断裂就比较常见,最熟悉的因素就是UV,只引起单链损伤不能引起双链损伤,原理是导致T的二聚进而导致DNA无法正常复制,而这个二聚是发生在DNA一条链上的,也没有特定的位点。
二者引发原因不同,就不存在哪个频率高的问题,但是在细胞中,DNA损伤激活的信号通路在单链及双链损伤中有部分重合。在高强度辐射或外界刺激的情况下,DNA损伤频率大增,主要表现为细胞凋亡,引起P53的活性增强;而正常细胞中,由于外界刺激不断但都不强烈,细胞实际处于一个损伤-修复的平衡状态,因此不会对生命体造成影响。
望楼主采纳!
DNA损伤包括双链损伤和单链损伤两种,损伤没有特定的断裂点,也未必是粘性末端。引起DNA双链损伤的因素有很多,比如化学药物Etoposide是抑制拓扑异构酶活性的,而拓扑异构酶在DNA复制及修复过程中发挥活性需要靠DNA的断裂和重连,抑制其活性导致DNA断裂后无法重连。而射线也可以引起双链损伤比如γ射线,只能引起双链损伤而不引起单链损伤。单链断裂就比较常见,最熟悉的因素就是UV,只引起单链损伤不能引起双链损伤,原理是导致T的二聚进而导致DNA无法正常复制,而这个二聚是发生在DNA一条链上的,也没有特定的位点。
二者引发原因不同,就不存在哪个频率高的问题,但是在细胞中,DNA损伤激活的信号通路在单链及双链损伤中有部分重合。在高强度辐射或外界刺激的情况下,DNA损伤频率大增,主要表现为细胞凋亡,引起P53的活性增强;而正常细胞中,由于外界刺激不断但都不强烈,细胞实际处于一个损伤-修复的平衡状态,因此不会对生命体造成影响。
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