【求助】片段缺失

如何将一个基因中的某个片段进行缺失呀？不知道用什么方法，具体怎么做？盼高手指点！！

你是希望什么缺失呀？直接从基因组上敲掉？还是在质粒上呀？能不能说清楚呀。。。

很多术语我不太清楚，就用个比方吧，假设说一段序列ATTGATCGAGGT，是PCR产物，需要将其中的ATCG除掉，只剩ATTGAGGT。这个应该怎么做。

呵呵，如果是这么少的碱基需要去掉，我想直接用点突变的方法就可以了,类似于Stratagene公司的点突变试剂盒做法。

对，用点突变的方法，overlap PCR ，先分别扩缺失片段的前后两段，再将这两段overlap融合就可以了。前一个片段的下游引物的5'端要引入后一个片段的5'端序列的反向互补序列。后一个片段的上游引物5'端要引入前一个片段3'端的部分序列。这两个引物刚好是反向互补序列。

哦，这样！这个方法是不是就叫重叠延伸PCR呀？我看了相关的叙述，但是还是不是很明白原理，也不知道这两个引物设计重合的片段需要多长？试验中有什么需要注意的相关事项？大侠有没有详细的资料能解释下？