【求助】自噬抑制凋亡的机制是什么？怎么研究？

我现在发现我的药物可以促进细胞死亡，但是不知道是通过什么途径作用的。因此进行了以下实验：

（1）空白对照
（2）药物给予组
（3）药物+caspase抑制剂
（4）药物+自噬抑制剂（3MA）

结果如下：（存活率MTT）
（1）100%
（2）50%
（3）80%
（4）20%

请问这个结果是不是说明：药物在诱导细胞死亡的过程中，自噬可以保护细胞损伤，而caspase依赖性的凋亡可以诱导细胞损伤。

如果是的话，怎么进行下面的研究呢？

自噬是一个发生在真核细胞中由细胞初级溶酶体处理内源性底物的重要生理过程，生命体借此维持蛋白代谢平衡及细胞内环境稳定，这一过程在细胞清除废物、重建结构以及生长发育中起重要作用，并与疾病的发生密切相关。自噬性细胞死亡是坏死、凋亡以外的另一种细胞死亡形式。你首先要搞清楚你的药物是针对哪一种细胞死亡？你这个实验的目的是要区分几种死亡形式吗，意义何在，我个人感觉你的实验设计目的性不是很明显。

如果你要知道你的药物可以促进细胞死亡，是通过什么途径作用的。应该首先检测每种细胞死亡途径的标志性蛋白的水平变化。

药物作用后，LC3和caspase3的蛋白表达均有显著性升高。但是我觉得不能以此就做出判断是那种死亡方式，因为尽管LC3表达升高，但是自噬抑制剂没有促进细胞存活的作用。因此我个人认为药物引起的可能不是自噬性死亡，而是caspase依赖性的凋亡。并且此过程中，自噬可以保护细胞。

我也是觉得你的实验设计好像不是很明确。
但是从你预实验的结果看来，加用自噬抑制剂，细胞死亡率有明显差别（姑且这样说，不准确）。我认为，可应该更深入的进行机制的探讨，而不是在停留在表面想象的观察层面。如果某药物和自噬抑制剂联合应用的话，在临床抗肿瘤治疗中应该有很好的应用前景，我觉得很有意义啊。此结果说明自噬在此药物对细胞的作用中起到保护作用，那么药物作用细胞后可能出现了自噬现象，对细胞具有保护作用，此时加用3MA后就可以导致细胞死亡率增加了。我觉得你应该在此方面深入的探讨机制。面不能太广。

个人看法，只是觉得科研，有时候要多交流彼此的观点。