【求助】信号传导途径

由于最近的课题涉及到凋亡信号转导方面的知识，看了些文献，有很多疑点，1---关于凋亡途径，说法一：凋亡通路主要由3种：一是通过线粒体释放Cyto C介导的，第二个是通过激活死亡受体，经由TNF通路完成的，以上两条通路最后都要通过Caspase通路完成。还有第三条途径，就是通过AIF（凋亡诱导因子）来实现的，这条通路是不依赖于Caspase的。说法二：目前认为凋亡通路主要有:死亡受体途径,线粒体途径,和内质网途径三条, 三者都可经过caspase的顺次激活实现凋亡.内质网途径与线粒体途径和AIF的关系是什么
2----若要研究某因子蛋白A可促进细胞的凋亡，该选择哪条凋亡路径，A是不是应该结合该蛋白的生物学作用（若已知该蛋白有抗氧化应激，抗炎，降脂，抗纤维化等作用）B是否与该蛋白与其受体结合后的信号途径有关，信号途径如此复杂，该如何选择有意义的途径
3----关于线粒体凋亡路径，文献检测的指标有caspase-3、caspase-9、细胞色素C、还有线粒体膜电位的变化，如果检测了caspase-9和细胞色素C，既然已经有细胞色素C的释放说明线粒体膜已受损，还有必要检测膜电位的变化吗。怎么合理的选择检测指标呢
4-----引起线粒体膜受损的诱因都有哪些呢Bax/Bcl-2、ROS吗，
5-----ROS属于线粒体凋亡途径的吗，ROS是不是有时促进细胞凋亡，有时抑制凋亡，ROS高就是氧化应激反应高吧？
本人初学信号转导，很多问题不清楚，望大家多多指教。

2----若要研究某因子蛋白A可促进细胞的凋亡，该选择哪条凋亡路径，A是不是应该结合该蛋白的生物学作用（若已知该蛋白有抗氧化应激，抗炎，降脂，抗纤维化等作用）B是否与该蛋白与其受体结合后的信号途径有关，信号途径如此复杂，该如何选择有意义的途径

~undefined*建议先研究PARP及caspase-3的活化情况，然后再研究上游信号。

3----关于线粒体凋亡路径，文献检测的指标有caspase-3、caspase-9、细胞色素C、还有线粒体膜电位的变化，如果检测了caspase-9和细胞色素C，既然已经有细胞色素C的释放说明线粒体膜已受损，还有必要检测膜电位的变化吗。怎么合理的选择检测指标呢

~undefined*要想发高水平的文章，就必须要同时检测膜电位的变化，细胞色素C的释放。

4-----引起线粒体膜受损的诱因都有哪些呢Bax/Bcl-2、ROS吗，

~undefined*Bcl~F2~Ebax~EBcl~Fxl~Ebad~Ebim~Ebid都可以检测，这要看你的抗体有多少了。

5-----ROS属于线粒体凋亡途径的吗，ROS是不是有时促进细胞凋亡，有时抑制凋亡，ROS高就是氧化应激反应高吧？

~undefined*高浓度的ROS可以诱导脂质过氧化，导致线粒体膜受损，进而导致线粒体凋亡途径。但是不是唯一因素。

非常感谢magichunter的回答，目前实验已经研究出凋亡与caspase-3有关，想进一步分析凋亡路径。我是这样想的，1----测出凋亡后同时检测caspase-8,-9和-3，确定是否是线粒体通路，再进一步确定线粒体通路有关的蛋白，2----若想加入线粒体通路某蛋白的抑制剂，看是否确实通过线粒体通路，该选择谁的抑制剂？3-----内质网应激是不是最后也是通过影响线粒体进而对caspase通路作用造成凋亡的，如何说明不是内质网应激造成的？4----细胞色素C的测定都有哪些方法可以确定是从线粒体释放的，据说细胞色素C量少，且不好测定

关于cyt c 的检测看文献上基本是用western blot 做的，也有查到有卖cyt c试剂盒的不过都是比较贵的。

内质网应激途径检测Capase-12 及chop这两个指标有可行性吗