【求助】u0126使用

我的实验需要观察ERK通路在细胞分化中的作用，请问我在用u0126抑制ERK通路时是不是用u0126处理半个小时就可以了，还是一直维持u0126的作用浓度，u0126的抑制作用能持续多长时间，谢谢

不知道 我也很想知道

两年前的问题了，还有效不？

ERK在细胞分化中的作用已经基本明确。
一般来说正常生长的细胞在生长过程中ERK是激活的，也就是磷酸化的。因此想观察对ERK的抑制作用要先将其去磷酸化，具体操作可以用血清剥夺的方法，将培养基中的血清去掉，也就是细胞换液，换成不含血清的培养基。然后用U0126进行处理（在培养基中加入一定浓度的U0126，具体浓度可以通过做个剂量曲线确定）；然后再加入血清，或者能激活ERK的因子等，与未加入U0126的细胞对比ERK的磷酸化程度。
具体U0126可以维持多长时间，要看你多长时间换液了。一般来说两天是没有问题的。因为我做实验的时候是两天换一次液。超过两天，会有怎样的情况，不好说。但是先加入U0126之后 半小时在刺激ERK是不会引起其磷酸化的。
所以，综上所述，0.5小时～2天之间，抑制作用是有把握的。