【求助】急！！关于人外周血多形核白细胞PMN的分离及细胞趋化性研究？

急！！关于人外周血多形核白细胞PMN的分离及细胞趋化性研究？

实验新手，不知道有没有哪位师兄、师姐做过关于 人外周血多形核白细胞（PMN）的分离培养以及细胞趋化性的研究？
我在咱们园子里搜索了，只是大部分都是友情提供的，未亲身做过该实验，现在迫切的想知道有没有亲自做过该实验的老师朋友。
希望提供经验帮助，有失败的战友愿意提醒我该多注意什么的也好，都不胜感激！！！:I很着急！


关于人外周血多形核白细胞PMN的分离培养 不会的问题：
1 采集人外周静脉血 需要采多大量？多少血一般能收到多少细胞？
2 经费有限，希望了解有没有简便的花钱少的分离方法？
2 Percoll非连续密度梯度沉降法分离人外周血中性粒细胞
这个似乎采用的人不少，看到有 硅化试管，这个是什么？就是采血的抗凝管么？

关于 趋化实验 不会的问题：
1 有谁买过趋化小室吗，因经费限制希望买便宜的，质量有保证的，国内的只搜到江苏海门麒麟有卖，如果有用过的朋友的话麻烦告知一下结果怎么样，非常感谢！！
2 另外transwell小室做趋化研究是不是更好？更方便？如果有用过这个的朋友的话麻烦告知一下～而且能力有限没有找到其具体的使用说明，只在发表的文献上搜到一些很笼统的步骤，哪位高人做过的可以指教一下～非常感谢！！
3 我要做的实验是 研究用不同浓度，不同时间刺激的A细胞的培养上清 对PMN趋化作用的影响。不知道是需要同时做每个样本的三次重复实验，还是可以一开始一个样本只做一个小室，最后再重复三次呢？
4 选择孔的直径看文献选择的是3微米，这么小人的PMN可以穿过么？

可能问了一些很白的问题，自己最近看得很晕了，在这里希望大家多多帮忙，不吝指教～多谢多谢！！有做类似实验的朋友希望可以多交流～

我的邮箱
summer848822@163.com

希望有大侠帮助～

自己顶啊:(