蛋白质电泳槽 Western Blot 垂直电泳制胶器漏胶问题分析
威泰克
Western Blot转膜之前免不了要在蛋白质垂直电泳槽中跑胶分离蛋白质。关于制胶,大多数用户还是喜欢用电泳槽配套的制胶器来自己制胶跑电泳,经济实惠。但是很多实验室因为设备已经使用多年,常会发现垂直电泳槽的制胶器没有原来好用了,经常会有“漏胶”或者“漏液”的现象,也就是说,凝胶溶液还没有来得及凝固,就从玻璃板某个周围的某个缝隙“漏”出去了。
最糟糕的情况莫过于,漏液速度没那么快,刚加好溶液时看不出来有漏胶或者漏液,而等了半小时凝胶凝固之后才发现,玻璃板之间的凝胶已经偷偷地漏了一节下去,导致需要重新制胶。
用市面比较常见的制胶模具设计举例,在下图中可以看到,玻璃板中间盛装凝胶溶液,玻璃板两侧靠夹子夹紧玻璃板和边条压片,下方用一个较厚的橡胶垫做密封,这样就组成了一个单侧上开口的三明治夹形状。
如果密封的好,凝胶溶液就会凝固成与边条压片厚度一致的凝胶用来做后续的蛋白质电泳。
那么哪些地方可能会导致漏胶或者漏液这种问题呢?
1. 玻璃板侧方或下方不小心因磕碰受损,这样玻璃板受损处则不再平整,液体会从这些部位漏出。这种情况下只能更换玻璃板,而很多垂直槽的玻璃板和边条压片是粘在一起的,这种情况则需要一起更换。
有时由于清洗不到位,边条压片表面会有污物凸起,也会导致两侧不能密闭夹紧而漏胶。
2. 两侧的夹扣变松,或有些厂家的夹扣为了防止漏液,设计的很紧,时间长之后,玻璃板被挤压变形,密封性下降。这样玻璃板也会从两侧漏胶。
3. 底座的胶垫老化、变形或错位,玻璃板底部会发生漏胶。
4. 桌面不平整,玻璃板上夹具时不容易放正,玻璃板安装到夹具上时是相对于底座橡胶垫倾斜的,这样玻璃板底部会发生漏胶。
美国 WEALTEC 公司针对传统制胶模具的设计局限性,革新性地重造了 V-GES 垂直电泳槽的制胶模具设计,采用“全包围式”橡胶垫,在玻璃板下方、两侧、背部全部用橡胶垫紧贴密封保护。
全包围式设计可以精准固定玻璃板的角度和位置,防止出现因为玻璃板倾斜导致密闭不严而造成的漏胶。同时,边条压片也无需与玻璃板粘合在一起,固定空间内,边条也会被迫严丝合缝的与玻璃板周围的胶垫对齐。
而对于最常出现的玻璃板破损情况,由于V-GES垂直电泳槽采用的是与玻璃板分开独立的边条压片,在玻璃板破损时用户只需要更换玻璃板而不需要更换边条,大大节省了后期耗材成本。
用户对每种凝胶厚度只需要准备一套边条压片,即可任意更换随每套机器附赠的5套玻璃板,后期也仅需添置需要更换的玻璃板,而不需要考虑边条厚度。
垂直电泳虽然只是 Western Blot 中的一个小环节,但 V-GES 垂直电泳槽依然可以通过优秀的产品设计,更好地优化操作效率,提高用户产品用体验,希望 WEALTEC 对 Western 整体实验深度而专业的见解能够给用户不断带来惊喜的体验。
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