细胞培养[cell culture]
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高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo )的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外( in vitro )培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物 细胞要求的生存条件极其严格,稍有不适就要死亡。所以细胞培养技术(cell culture)就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。
动物细胞的生存环境与植物细胞差别很大,因而二者的培养方法很不相同。
(一)动物细胞培养
细胞培养方式大致可分为两种(图2-25):一种是群体培养(mass culture),将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层;另一种是克隆培养(clonal culture),将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中,各个细胞贴壁后,彼此距离较远,经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落,称为克隆(clone)。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。此外,为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法,使用大容量的圆培养瓶,在培养过程中不断地转动,使培养的细胞始终处于悬浮状态之中而不贴壁。
图2-25 群体培养(左)和克隆培养(右)
表 2-3 目前实验室中常用的几种细胞系
细胞系名称
细胞类型
来源
3T3
成纤维细胞
小鼠
HeLa
宫颈癌上皮细胞
人
BHK21
成纤维细胞
叙利亚仓鼠
PtKl
上皮细胞
袋鼠
L6
成肌细胞
大鼠
PCI2
嗜铬细胞
大鼠
SP2
浆细胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤浆细胞
小鼠
CHO
卵巢细胞
中国地鼠