细胞培养过程中常见问题及其解答

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1.如何选用培养基?

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养 、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。

2.为什么要热灭活血清?

加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学 研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

3.L-谷氨酰胺在细胞培养 中重要吗?它在溶液中不稳定吗?

L-谷氨酰胺在细胞培养 时是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。

4.GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定 ?

GlutaMAX-I二肽是L-谷氨酰胺的衍生物，将其不稳定的α-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。