培养细胞的观察检测方法
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细胞培养
(Cell Culture)专题:
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活细胞的观察检测方法
培养细胞常用的染色方法
细胞生长状况有关指标的检测方法
细胞生物活性的有关化学检测方法
电子显微镜技术
一、活细胞的观察检测方法
细胞在体外培养过程中需要每天观察,以便及时了解细胞生长状态、数量改变、细胞形态、细胞有无移动、有无污染、培养液pH是否变酸、变黄、是否更换等。
细胞常规检查的方法为:
肉眼观察
相差显微镜观察
1.肉眼观察
一般常规检查用肉眼即可观察,主要看培养液的颜色和透明度的变化。
大多数细胞适于在pH 7.2~7.4条件下生长,低于pH 6.8或高于pH 7.6对细胞有害,甚至造成细胞退化或死亡。细胞对碱性不如对酸性的变化耐受,偏酸的条件比偏碱的环境对细胞生长有利。
随细胞数量的增多、代谢加强,释放CO2增多,使pH 降低。为了维持培养基恒定的pH ,多在培养基中加入磷酸盐等缓冲剂。
羟乙基哌嗪乙硫磺酸(Hepes):对细胞无毒性,也不起缓冲作用,主要作用是防止pH迅速变动,在开瓶通气培养或活细胞观察时能维持较恒定的pH值。
若培养瓶、瓶塞漏气, 使CO2溢出,或者由于洗刷不洁、残留碱性物,使培养液变碱发红,致使细胞难以生长,甚至死亡。