实验71 蟾蜍皮肤感受器传入冲动的观察

实验71 蟾蜍皮肤感受器传入冲动的观察

　　【目的要求】

　　1．学习蟾蜍皮肤感受器传入冲动的记录方法。

　　2．了解感受器的种类及基本特征。

　　【基本原理】

　　感受器是完成感觉过程的第一个环节。它的基本机能是接受环境的刺激，并将刺激的能量转化成一连串的神经冲动。皮肤属外感受器，具多种特异的感觉末梢及传入纤维，因而可接受和辨别不同形式刺激而产生多种感觉。本实验是在离体的蟾蜍皮肤-神经标本上观察皮肤感受器对刺激的分辨能力及换能过程，进而了解和掌握感受器的一般生理学特征。

　　【动物与器材】

　　蟾蜍、常用手术器械、前置放大器、示波器与示波照相机、微操纵器、屏蔽箱、标本槽、橡皮泥、玻璃棒（纯头）、毛笔及滤纸片、针灸针、任氏液。

　　【方法与步骤】

　　1．标本的制备

　　（1）取蟾蜍一只，常规双毁髓后。在背中线切开皮肤（长约4cm），稍向两侧分离，于髂腰骨肌与腹外斜肌之间隐约可见3根向腹部走行的脊神经，即第4、5、6脊神经。

　　腹部皮肤神经走行的特点（图10－6）是：自脊髓发出后，先在腹膜外游离一段（约2cm），然后进入腹内斜肌与腹外斜肌之夹层，在两层肌肉间穿行（沿途常有小分支穿出到达皮肤或肌肉），在接近所支配的腹部皮肤时，神经主干从腹外斜肌钻出，再行走1cm左右，便到达皮肤。

　　（2）看清3条神经后，用镊子将腹外斜肌提起，在髂腰骨肌与腹外斜肌接合处剪开肌层（注意勿伤及神经），这时可清楚地看到在腹腔中游离的3条脊神经。任选其中一根（一般选第5支，或3根均保留）在脊神经根部用丝线结扎、剪断。轻提丝线向下分离。

　　（3）在神经钻入肌肉的部位用镊子将两层肌肉轻轻撕开，于肌肉的夹层中向腹部仔细追踪。注意：撕开一段，分离一段，并经常滴加任氏液，以保持湿润，切忌用力过猛以免伤及神经。

　　（4）在接近末梢区域时，要先将周围皮肤与肌肉间的结缔组织切断。这时要格外小心，因神经末梢分支与结缔组织凭肉眼常难以分辨，所以可适当多保留些结缔组织，但不要保留肌肉。（此步最好在解剖显微镜下操作）。

　　（5）从蛙体上剪下该神经所支配的皮肤，大小约为9cm² 最好使神经末梢位于标本正中。标本制备完毕后，置于任氏液中备用。

　　2．仪器的连接与参数的调整按图10－7连接放大器与示波器。

　　（1）放大器增益1000，时间常数0.001s，高频滤波10KHz（即频宽150Hz—10kHz）。

　　（2）示波器时基0.2—0.5s/cm，自动扫描（拍照时扫描扩展→x轴外接档，使光点固定）。

　　上线：记录传入冲动发放；灵敏度20—100mV/cm。

　　下线：作时间标记：由刺激器输入1次/s的单脉冲信号。系统总灵敏度：20—100μV/cm。

　　（3）示波器照相机快门速度：T门。光圈：f/2。拍摄方式：连续拍照。走片速度：20mm/s或10mm/s。

　　（4）普通照相机快门速度：B门。光圈：f/2.8。拍摄方式：单片拍照。示波器慢扫描，具体参数视不同刺激的适应时间而定。

　　3．标本的放置图10－7下图为标本槽，甲槽中央放一块海绵（或填充棉花代替），高度与内槽平齐。剪一块大小与海绵相仿的滤纸，用任氏液浸湿，放在海绵表面，然后将准备好的标本小心移入槽内，皮肤表面朝上，轻轻地放在滤纸（或浸湿的棉花）上。皮肤展平后，用镊子提起神经游离端的引线，经隔障缺口引入乙槽中，搭在记录电极上。隔障缺口用凡士林封住，神经干埋于其中，用滤纸片吸干乙槽中神经表面的水分，并加满石腊油（图10－7上）。

　　分别称好1g、5g、10g、20g的橡皮泥，做成底面积相同的重物。

　　4．标本放置妥当后，观察无刺激时有无静息冲动发放。

　　5．触觉刺激用毛笔在皮肤表面轻触，观察传入冲动的发放，必要时可拍照记录（图10-8A）。

　　6．压觉刺激将不同重量橡皮泥（1g、5g、10g）分别放在皮肤表面，观察压觉刺激对传入冲动的影响（图10－8B）。

　　7．痛觉刺激用针灸针刺激皮肤，注意传入冲动的发放有何改变（图10－8C）。

　　【注意事项】

　　1．为便于控制和防止干扰，各种形式的刺激均可通过微操纵器进行，操纵器与人手接触点要严格绝缘。

　　2．记录前，先使用轻触觉检查一下标本质量，排除干扰，修正各项参数，使整个记录系统稳定下来。

　　3．标本制备的好坏是整个实验成功与否的关键，实验自始至终都要精心爱护标本。