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实验78 日本青萍6746的光周期诱导

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实验78 日本青萍6746的光周期诱导

原理

  日本青萍6746(Lemna paucicostata 6746)属单子叶植物浮萍科(Lemnaceae)浮萍属(Lemna),是一种短日照植物,漂浮于水面生长,繁殖能力强,生长周期短,在条件合适时,培养17天即可开花。由于植株小,有利于在人工控制条件下进行培养,是一种很好的实验材料。

仪器药品

  高压灭菌锅   超净工作台或接种箱

  照度计     解剖镜

  恒温培养室   定时开关

  黑布 Hutner培养基(见附表16)

  三角烧瓶    长镊子

操作步骤

  1.以100倍浓度分别配制Hutner培养基中的大量元素和微量元素贮备液,置冰箱中保存。

  分别吸取大量元素和微量元素各10ml加到约900ml蒸馏水中,加入蔗糖10g,定容至1000ml。然后取出800ml加蒸馏水定容至1000ml,即得8/10浓度Hutner培养基,调节pH至5.6─6.0,分装于三角烧瓶中,每瓶40ml。塞上棉花塞,并用牛皮纸包扎好,于高压灭菌20分钟(压力为1kg/cm2)。

  2.于超净工作台上(或接种箱中)按无菌操作要求,用长镊子接入1个由3片叶状体组成的青萍6746。

  3.接种后置于长日照条件下(每天8小时黑暗,16小时照光),光照强度为2000lx,培养室温度为26─27℃,培养7─8天。

  4.将在长日照条件下培养7─8天的青萍6746,转接至新鲜培养基中,以后每隔3─4天转接一次。按下表所示进行不同天数的短光照处理,每一处理5个重复。

  5.每一处理结束后,仍将它放回长光照条件下培养,注意观察不同处理对开花的影响。一般从处理的第1天算起,到第9天在经过合适天数短光照处理的叶状体边缘裂口上,即可看到有针尖大小的小黄花(图27),每日记录开花的叶状体群数,直至花数下降为止。

  6.如时间允许可进行花序的观察。青萍6746通常每个叶状体群有1个花序,少数有2或3个,可在解剖镜下小心取出花序,花为单性花,雌雄同株,每一花序有雄花2朵,雌花1朵,有圆匙状的膜质苞片。雄花由1个雄蕊构成,花药4室(图28)。

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