实验11 终板电位的测定

实验11 终板电位的测定

　　【目的要求】

　　1．学习测定骨骼肌终板电位的实验方法。

　　2．观察终板电位和微终板电位的波形。

　　【基本原理】

　　在神经-肌肉接点的传递过程中，既有化学因素也有电学因素参与。当神经冲动（动作电位）到达运动神经末梢时，细胞膜去极化，通透性发生变化，细胞外液中的Ca² 进入神经末梢，促使大量突触小泡同时向突触间隙释放乙酰胆碱，与终膜外表面的蛋白质受体相结合，出现许多小终板电位（minuteend－platepotential，简写MEPP）。这些小终板电位综合起来，形成了终板电位（end－PlatePotential，简写EPP）。当终板电位达到约40mV时，肌膜便产生可扩布的动作电位，最后引起肌肉收缩。

　　实验采用电生理学方法，将玻璃微电极插入终板区的肌肉纤维内，观察终板电位。但在正常情况下，由于肌肉纤维动作电位的干扰，终板电位不易观察。如用箭毒处理肌肉标本，由于箭毒能与乙酰胆碱争夺终膜上的受体，使乙酰胆碱失去传递兴奋的能力，从而阻滞神经-肌肉接点处的兴奋传递作用，这就可以在没有动作电位干扰的条件下观察终板电位。

　　【动物与器材】

　　除同实验10外，另需配制5×10^-6 mol/L管箭毒碱（d-tubo-curarine）。

　　【方法与步骤】

　　1．按实验2制备坐骨神经-缝匠肌标本。用锌铜弓检查后置于任氏液内5min。

　　2．按实验10安装、连接、调试仪器装置。刺激器采用手控单脉冲或双脉冲信号，波宽0.1－0.2ms。示波器采用“DC”双端输入，外触发扫描，“灵敏度”为10—20mV/cm，时基5ms/cm。

　　3．微终板电位的观察借助解剖显微镜，找到在缝匠肌内表面走行的神经分支。调节微操纵器的水平和垂直位移旋钮，将微电极插入神经末梢刚刚消失的部位，即可看到缝匠肌的静息电位（约-90mV）。提高示波器的灵敏度（约为0.5—1mV/cm），可看到在静息电位的基础上出现微小的电位变化，这就是自发的微终板电位。在此基础上，反复移动微电极的位置，直至得到振幅最大的微终板电位。

　　4．终板电位的观察开启电子刺激器，刺激神经，示波器即显示终板电位。反复移动微电极的插入部位，找到振幅最大的终板电位。注意：在电位的上升支上有一个转折，转折下部为终板电位，转折上部为肌纤维的锋电位。

　　5．箭毒的阻滞作用向肌槽中灌流5×10^-6 mol/L管箭毒碱，开启刺激器，刺激神经，借助解剖显微镜观察肌肉的收缩反应，可以看到肌肉收缩的强度逐渐减弱，最后消失。但为了避免箭毒的作用过深，影响实验观察，当刺激神经仅仅引起肌肉极微弱的收缩时，即可停止管箭毒碱的灌流，并用任氏液冲洗。在整个实验过程中，注意观察电位变化，直至得到单纯的终板电位（图2-18）。