RNA浓度和质量检测的方法

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我们实验室主要是采用分光光度计 测定RNA浓度，本人是刚步入实验室的菜鸟，总结了下师兄RNA浓度测定的方法。

其实今天的主要任务是测定一下昨天提出的总RNA的浓度。真怕结果不理想!测定浓度真的是一件大工程。首先要准备至少100ml的DEPC水，这是用来稀释RNA的浓度和清洗比色杯。还有就是滤纸片和滤纸条，可以用他们来吸取比色杯里残留的液体。当然还应该把移液枪，枪头和一次性手套常备核酸蛋白测定仪的旁边。不过最容易被忘记的就是废液瓶，呵呵!现在该是打开伸手的时候了。

200μl，10μl的枪头放在左边，核酸蛋白测定仪在中间，废液盒在右边，滤纸在抽屉里。

1.第一步打开仪器的电源开关;

2.按下RNA键;

3.按下dui键(设置稀释倍数)

4.然后从冰箱拿出样品放入冰盒，先吸取100μl的DEPC水，放入仪器中，按下blank键，调零。切记加了水的枪头不要仍，待会还要混匀用呢。

5.吸取1μl的样品，再用刚才的100μl的枪头反复吸取，以将样品和水充分混匀。

6.按下sample键，测定浓度;记下屏幕中的数据(OD260/280，OD260/230，浓度)。到此为止实验并没有结束，还要做清洗工作。

7.用准备好的DEPC水冲洗杯子，废液到如废液盒中

8.将滤纸铺平，比色杯倒扣控出多余的水，再用滤纸条伸进杯中吸取残存液体，就可以再测下一个了，呵呵。

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利用分光光度计 测定OD260/280，OD260/230，是检测核酸样品浓度常用方法之一，2004你那Thermo推出了NANO DROP可以很快速的测定RNA样品浓度和质量，而且测定只需要1微升的样本即可，这样就可以快速、简单测定RNA浓度，有条件的实验室可以采用。