动物实验基本操作之六“常规采血方法”
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一、不同实验动物采血方法的选择
决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血pH值以及K+、Na+、Cl-离子浓度,必须采取动脉血液。
(一)、大、小鼠的采血方法
1、颈静脉或颈动脉采血
2、股静脉或股动脉采血
3、心脏采血
4、尾部采血
5、眼眶采血
6、断头取血
(二)、豚鼠的采血方法
1、耳缘剪口采血
2、心脏采血方法同大、小鼠、家兔基本相同。取血量可根据需要,采集部分血5~7ml,采集全部血15~20ml。
3、股动脉采血方法同大、小鼠。
4、后肢背中足静脉采血助手固定动物,将后肢膝关节拉直。术者可从动物脚背面找到背中足静脉,常规消毒后,左手拉住豚鼠趾端,右手持注射器穿刺,抽血后立即用纱布或棉球压迫止血。反复取血可两后肢交替使用。
(三)、家兔的采血方法
1、耳缘静脉取血法
选好耳缘静脉,拔去被毛,用二甲苯或酒精涂擦局部,小血管夹夹紧耳根部,使血管充血扩张。术者持粗针头从耳尖部血管,逆回流方向刺入静脉内取血,或用刀片切开静脉,血液自动流出,取血后棉球压迫止血,取血量2~3ml。压住侧支静脉,血液更容易流出;取血前耳缘部涂擦液体石蜡,可防止血液凝固。
2、耳中央动脉取血法
家兔固定箱内,用手揉擦耳部,使中央动脉扩张。左手固定兔耳,右手持注射器,中央动脉末端进针,与动脉平行,向心方向刺入动脉。一次取血量15ml。取血后棉球压迫止血。注意兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩。抽血前要充分使血管扩张,在痉挛前尽快抽血,抽血时间不宜过长。中央动脉末端抽血比较容易,耳根部组织较厚,抽血难以成功。
3、后肢胫部皮下静脉取血法
家兔固定于兔台上,剪去胫部被毛,股部扎止血带,胫外侧皮下静脉充盈。左手固定静脉,右手持注射器,针头与静脉走向平行,刺入血管后回抽针栓即有血液进入注射器。
4、心脏取血法
将家兔固定于兔台上,或由助手在坐位将家兔以站立位固定,剪去胸部被毛,常规消毒。术者在胸骨左侧3~4肋间摸到心尖搏动,在心搏最明显处作穿刺点;右手持注射器,将针头插入肋间隙,在左手触摸到心跳的配合下,垂直刺入心脏,当持针手感到心脏搏动时,再稍刺入即到达心腔。每次抽血量20~25ml。针头宜直入直出,不可在胸腔内左右探索。拔针后棉球压迫止血。
家兔颈动静脉和股动静脉取血法与大鼠相同,均需作相应的血管分离手术。
(四)、狗、猫的采血方法
1、心脏取血法
狗心脏取血方法与心脏采血同大、小鼠、家兔相同。可抽取较多的血液。
2、小隐静脉和头静脉取血法
小隐静脉从后肢外踝后方走向外上侧,头静脉位于前肢脚爪上方背侧正前位。剪去局部背毛。助手握紧腿,使皮下静脉充盈。术者按常规穿刺即可抽出血液。
3、颈静脉取血法
狗以侧卧位固定于狗台上,剪去颈部背毛,常规消毒。助手拉直颈部,头尽量后仰。术者左手拇指压住颈静脉入胸腔处,使颈静脉怒张。右手持注射器,针头与血管平行,从远心端刺入血管。颈静脉在皮下易滑动,穿刺时要拉紧皮肤,固定好血管。取血后棉球压迫止血。
4、股动脉取血法
麻醉狗或清醒狗背位固定于狗台上。助手将后肢向外拉直,暴露腹股沟,剪去背毛,常规消毒。术者左手食指与中指触摸动脉搏动部位,并固定好血管;右手持注射器,针头与皮肤呈45°角,由动脉搏动最明显处直接刺入血管,抽取所需血液量。取血后需较长时间压迫止血。
5、耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血
二、采血时要注意
① 采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25~28℃,冬季15~20℃为宜;
② 采血用具有采用部位一般需要进行消毒;
③ 采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;
④ 若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。
1、取少量血
2、取中量血
3、取大量血
4、最大安全采血量与最小致死采血量