足细胞的来源及培养方法
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足细胞来源:
丁香园网友yulinlong的观点为:
很多细胞中心就有卖的,或者有的公司可以代理ATCC公司的就可以。
有的文献用的永生化细胞系是他们自己建的系或者别人建系赠予的,你也可以考虑向国内或者国外去请求馈赠。有的会给的。
丁香园网友wenyueqiang的观点为:
美国爱因斯坦大学的PETER MUNDEL有
足细胞培养方法:
大鼠原代足细胞:
丁香园网友gaoxueyan99的观点为:
培养方法:过筛:100目,150目,200目,收集200目内为小球
1、选取100克左右大鼠,无菌取肾,去包膜,分离皮质,剪刀切成小块!
2、100目上注射器芯研磨,DMEM培养液冲洗100目网筛多遍,DMEM冲洗200目内组织!
3、离心管收集,1000转离心5分钟!
4、完全培养基重悬沉淀,接种于培养瓶或皿!一只大鼠一皿或一瓶!
5、5%CO2,37度培养箱最内测放置.
6、培养五天细胞换液,七天左右细胞传代!
细胞株:
丁香园网友wenyueqiang的观点为:
养了几个月足细胞,是peter mundel的gift,感觉很好养的!
用1640培养液,10%的胎牛血清,GARMA干扰素!!33度增殖,37度分化,37度养10到14天!鉴定足细胞多用足细胞特异性分子,做间接免疫荧光!
注意操作规范,不要污染就行啦.
丁香园网友haha63的观点为:
足细胞podocyte应该是肾小球内(脏)层上皮细胞,这株细胞目前只有私人收藏,全球细胞库没有严格意义上的足细胞可供出售。
在文献中提到了“人肾小球系膜细胞系(human mesangial cell line,HMCL)由英国伦敦皇家公立医院肾脏中心阮雄中博士惠赠-----HMCL 为用T2SV40 及H2ras 原癌基因转染的永生系,保持正常人肾系膜细胞基本的形态学和生物学特征"。
因为足细胞很难找到,国内一些研究者已改用肾小管上皮细胞hk-2