胶体金在快速检测中的地位
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优良的稳定性、灵敏度、精确度及制造过程中的可重复性,使得胶体金适合基于膜的检测技术。
快速膜检测需求广泛,可应用于诸多领域(见下表)。随着灵敏度和特异性的提升,大量的潜在应用可能是作为替代昂贵仪器检测方法的低成本选择。
快速检测的应用
临床医用 变态反应 心梗标志物 退行性病变 药物滥用 生殖 法医 免疫分型 感染性疾病 血清学试验 性传播疾病 | 应激反应 |
这篇文章重点讲述此种检测方法中极为重要的组成部分---检测标记物的生产制造对整个检测系统的性能及可靠性的影响;尤其是强调了胶体金标记物在此检测功能中的优势。
什么是快速检测?
Hugh Burden摄 courtesy BB International
在非临床检测中,样本可能是由土壤、粉尘、植物或者食品制备的微量溶液,它们同样可以直接应用膜试纸条检测。这种检测方法无需仪器操作,可应用于临床、实验室、室外或者家庭——通常为无操作经验人员使用。
快速检测法有两种形式——层析和渗滤。层析是最普通的形式因为其制造及使用都比较简易,这两种形式所涉及的原理虽然相同,但我们这里将要讨论的是层析检测法。
一个快速检测的底层一般是硝酸纤维素膜,在它上面固定了检测蛋白,通常是抗体或抗原(图1)。
图1 侧向层析快速检测试纸条的结构图
连接着膜的是包含有干燥金标的金标垫(通常是玻璃 纤维)。对于目前大多数可做的检测项目,这种结合垫含有吸附了针对待检分析品的特异性抗体或抗原的金粒子。样品垫通常为纸质,附着着结合垫。
当使用样品垫时,液体样品通过毛 细扩散作用穿移过结合垫,再水化金交联物,使待分析样品与交联物相互作用。然后金交联物与待分析样品复合物转移至膜条带上再移向蛋白结合物,复合物在此处被固定后以一条细细的红线的形式产生明显的信号。第二条线是控制线,由余下的金交联物形成于膜上,表明测试完成。
顾名思义,快速检测应在短时间内提供结果,准确的说是在几分钟内。这种检测法必须方便、精确、可靠、廉价、是一次性的而且操作简易的。它们也必须容易和清楚的说明书,甚至是没有经验的使用者也能操作。从生产厂家的观点来看,这种快速检测将会带来巨大的附加值,且容易向世界各地的使用者推广,而无论使用者其有无此项检测的经验。
快速检测功能广泛。改变抗体或者对条带的化学配方作微小的变动,同样的设计应能用于多种检测。