液泡系的活体染色及电镜照片观察
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一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察
(一)原理
在动物细胞内,凡是由膜所包围的小泡和液泡除线粒体外都属于液泡系,包括高尔基器、溶酶体、微体、消化泡、自噬小体、残体、胞饮液泡和吞噬泡,都是由一层单位膜包围而成。软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体,能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等,因而液泡系发达。
中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。
(二)方法
取一只蟾蜍,破坏脑和脊髓,剪开胸腔,取胸骨剑突软骨最薄部分的一小片,放在载片上,滴两滴1/3000中性红染液,染色8~10分钟,用吸水纸吸去染液,加一滴Ringer氏液,盖上盖片,吸去多余Ringer氏液。
(三)结果
显微镜下观察,可见软骨细胞为椭圆形,细胞核周围有许多染成玫瑰红色。大小不一的小泡,即软骨细胞液泡系。
二、大白鼠胫骺软骨细胞电镜照片的观察
动物细胞液泡很小,即使是活体染色也只能看出是一个小点,为了进一步看清液泡的结构我们有必要观察软骨细胞的电镜照片。
大白鼠胫骺骨细胞电镜照片,细胞核与核仁很清楚,细胞质中有丰富的粗面内质网,液泡系发达,液泡由单层膜包围,细胞周边有液泡释放。