miRNA Northern Blot实验技术应用
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MicroRNA（miRNA）是真核生物中一类长度约为20-25 nt（核苷酸）的非编码单链RNA分子，在生物进化过程中高度保守，约占整个基因组基因总数2%。大量研究表明，miRNA在多种生物过程中起关键作用，包括细胞的发育、分化、增殖和凋亡等；并且功能研究已证实多种miRNA分子与肿瘤发生、发展过程相关，miRNA具有类似于致癌基因或抑癌基因的作用。
最早被发现的两个miRNAs——lin-4和let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端，以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制，进而抑制蛋白质合成，阻断mRNA的翻译。也有miRNA可以与目标靶基因完全互补，从而抑制基因的表达，提示miRNA可能包含和 siRNA类似的作用方式。
随着miRNA研究的不断深入，各种研究方法层出不穷，包括miRNA芯片、Real time-PCR、Northern Blot、RNA酶保护实验等等。而在这些方法中最经典方法的当属miRNA Northern Blot，miRNA Northern Blot具有结果直观、可靠等方面的优势，因此许多SCI杂志要求miRNA方面的研究需提供Northern Blot实验结果。
美国Signosis的miRNA Northern Blot检测试剂以其简便的实验操作步骤为广大研究人员所称道，特别是基于专利技术开发的高敏miRNA Northern Blot检测试剂，因其能够检测到低丰度的miRNA而成为美国Signosis的明星产品。使用美国Signosis开发的miRNA Northern Blot试剂发表了很多高水平的SCI文章，下面通过对其中几篇文献的分析来向大家详细介绍美国Signosis miRNA Northern Blot检测试剂。
1. 文献一：Effect of miR-23 on Oxidant-Induced Injury in Human Retinal Pigment Epithelial Cells
该文章中，作者使用miRNA Northern Blot检测试剂检测正常以及AMD病变的RPE细胞中miR-23a的表达情况。如上图所示，实验结果条带清晰，明显可见在不同样本中miR-23a的表达差异。
2. 文献二：Functional analysis of microRNAs in human hepatocellular cancer stem cells
使用miRNA Northern Blot检测试剂分析不同样本中miR-181a和let-7a的表达情况。从上图可以看到，两种miRNA的表达量在正常HepG2细胞中表达量很低，而在N-LSC、HSC-SR、HSC-DF中表达量依次上升。从图中可以看到，即使是使用普通的miRNA Northern Blot检测试剂，也可以清楚地检测到低表达的miRNA。
3. 文献三：Characterization of the stress associated microRNAs in Glycine max by deep sequencing
该文章使用的是Signosis高敏miRNA Northern Blot检测试剂，检测了不同样品中的多个miRNA表达，结果中可以清晰地看到低丰度的miRNA条带，同时高表达miRNA条带形状也很美观，没有聚集成一团。Signosis高敏miRNA Northern Blot检测试剂可以清楚分辨miRNA表达差异，特别在检测灵敏度较普通的高出1到2个数量级。
从上面三篇文献的Northern Blot实验结果来看，Signosis研发的普通及高敏miRNA Northern Blot检测试剂效果是稳定的。整套试剂包含实验所有组分，客户只需相应的仪器即可完成实验所有步骤。可以清晰的检测到低丰度miRNA，同时也不会影响到对高丰度miRNA的检测。
