实验动物的生理、生化、免疫、血液学等各项指标的检测方法

实验动物的种类繁多，各种指标的检测方法往往各不相同，而且每个人在做动物试验时所需要检测的指标也各不相同，每个人掌握的测定方法也各不相同。

能到本版来的各位战友相信都做过动物试验，也检测过实验动物的指标，希望各位战友能将自己检测实验动物的各种指标时所使用的方法拿出来与大家分享。以至于dxy能够将各位的实用方法系统的组织起来，形成一个比较完善的实验动物常用指标的检测方法！

一、体重的测量方法

动物体重的测量一般使用普通天平或电子天平等称量仪器，在称量前应禁食（不禁水），以减少食物对体重的影响。如果进行长期的实验时，应每隔7～10天称量一次。

小鼠、大鼠：称量可用普通的天平或者电子秤称重。

兔、豚鼠：可直接放在婴儿秤上称重，从婴儿秤圆形刻度盘上读取动物体重。

犬：经训练后可直接放在磅秤上称重。未经驯服的犬，先将犬嘴绑好，由实验员把犬抱起站在磅秤上称重，记下读数，减去实验员体重，即为动物体重。

二、体温的测定方法

动物体温测定可采用普通体温计（肛表、口表）或半导体温度计，为防止测定过程中动物挣扎，以至于挫伤肠壁或折断体温计，在测定前应先固定好动物。肛表测温可由实验者右手固定体温计，3分钟后取出观察读数。半导体点温度计在测定时可立即从温度表上读取温度数。

测定温度时应注意如下几点：

（１）检查肛表水银柱是否已甩下来，半导体点温度计的指针是否指在零位。

（２）环境温度对动物体温的测定有一定的影响，一般环境温度应控制在18～28℃。

（３）测量温度时应连续测定2～3次，取平均值。

（４）插入直肠的深度取决于动物的大小，犬、猫、兔3.5~5cm，豚鼠3.5cm，大鼠、小鼠1.5~2.0cm.为了使插入深度一致，可用胶皮管套在温度计上，作为“限止环”。

（５）每次测定时间要一致。一般体温计放入直肠内固定时间为3分钟，而每天测定的时间也大致一样，如第一次在上午测定，以后均应在上午测定。

（６）防止有大便阻塞和动物挣扎造成直肠损伤及出血现象。

（７）测定时尽可能使动物处于自然状态，勿使其过于紧张、恐惧。

三、脉搏的检查方法

检查犬、猫、兔等较大动物的脉搏时，先将动物略加固定，待其安静后，用右手伸入动物股部内侧，用手指按股动脉测脉率1分钟，计算每分钟脉搏次数。小动物的脉搏不易摸测，可直接在动物左侧胸部用手触及心跳最明显处，计数一定时间，算出每分钟心跳次数，也可用听诊器或专用测量仪器进行测量。此外，在测量时应排除温度、湿度、动物的兴奋状态、健康状况、特殊的生理状况等对脉搏的影响。

四、呼吸频率的测定方法

根据呼吸原理，动物的呼吸次数测定方法有人工记录法、气管插管呼吸描记法、鼻插管呼吸描记法、记录仪法（生理记录仪法）。

（一）人工记录法：测定呼吸频率前，首先必须使动物处于相对安静状态，然后以肉眼观察并记录呼吸的次数，一般要求记录1分钟的呼吸次数。

（二）气管插管描记法：按气管插管术插好Y型气管插管，然后将Y形插管的一端经橡皮管与玛利气鼓相连，即可描记呼吸，另一端可作为呼吸备用通道，若需人工呼吸时，将此端与人工呼吸机送气管相连，开动人工呼吸机即可进行人工呼吸。

（三）鼻插管描记呼吸法：将动物固定，插管连以橡皮管，将插管涂上液体石蜡后，插入一侧鼻孔内，用胶布固定。橡皮管的另一端与玛利气鼓相连，描笔将呼吸活动记于记纹鼓上。转动鼻插管的角度，使描笔的划线达到最大幅度。

（四）二道生理记录仪测定法：将张力换能器与记录仪和动物相连。经换能器导线输入记录仪，换能器弹簧经细线固定于动物体表一定位置，使细线牵张力适度。按测呼吸需要选择适当的灵敏度、时间常数、滤波后，将前置测量开关置于通的位置。按下走纸速度键，即可描记呼吸变化曲线。

五、尿液的检查方法

用清洁容器收集新鲜尿液，以晨尿为好，因晨尿浓度较高，易发现病理成分。

(一) 尿量检查

常用实验动物的尿量如下:

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动物种类 尿量(mL) 动物种类 尿量(mL)

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猕 猴 1 10—550 犬(4．5kg) 65—400

马 1 900—11 400 猫(2—4kg) 40—120

牛 1 1400—19 400 兔(1．5—2．5kg) 60—250

猪 1 900—3 800 豚鼠 15—75

山羊 700—2 000 大鼠 10—15

绵羊 900—1 900 小鼠 1—3

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1、尿量增多 一昼夜尿量超过正常值范围，称为多尿。生理性尿量增多见于大量饮水或食含水分过多的蔬菜所致。病理性尿量增多，见于糖尿病、尿崩症等。

2、尿量减少 一昼夜尿量少于正常值范围称少尿。见于急性肾炎、急性肾功能衰竭等。

（二）尿色检查 正常新鲜尿液多为黄色或淡黄色，尿的颜色多受食物或药物的影响。病理情况下可有以下变化：

1、血尿 呈洗肉水样或混有血凝块。

2、血红蛋白尿 呈浓茶色或酱油色，镜检无红细胞，隐血试验为阳性。

3、胆红素尿 呈深黄色，振荡后泡沫亦呈黄色。

4、乳糜尿 为乳白色尿液，有时混有少量血液。

（三）尿酸碱反应 正常一昼夜混合尿液呈弱酸性，pH值为5．4—8.4.在酸中毒、发热时，尿液可呈较强酸性，可用pH试纸测定。

六、粪便的检查方法

粪便检查常用于了解粪便中有无炎性产物、血液、寄生虫卵或虫体等病理成分，并可判断胃肠、胰腺、肝、胆功能状态及粪便中有无致病菌。

（一）一般性状检查

1、颜色：黄褐、黑色、灰白、鲜红等。

2、性状：水样或粥样、粘液、脓样、血样。

3、气味：特殊臭味、酸臭、**臭。

（二）显微镜检查 在洁净的载玻片上滴1滴生理盐水，用木签挑取少许粪便与生理盐水混合，涂匀，厚度适中。仔细观察各种细胞、阿米巴包囊及滋养体等。

（三）隐血检查 当上消化道少量出血时，粪便外观无异常改变。凡疑有上消化道少量出血，应进行隐血检查。

隐血检查时，将少许粪便涂于洁净玻片或滤纸条上，加1％联苯胺冰醋酸液及3％过氧化氢液各一滴。如无颜色改变为阴性反应；出现蓝颜色变化为阳性反应。根据颜色出现的快慢和深度，将阳性结果分为四级：立即出现深蓝色为(++++)；30s内出现为(+++)；l min内出现为(++)；2min内出现为(+)。

正常为阴性，上消化道出血为阳性。