ABA对气孔关闭影响的实验检测

【原理】

植物内源激素ABA（脱落酸）能使气孔关闭，降低叶片蒸腾速率，外源ABA也有同样的作用。可以用称量法、镜检法直接或间接地测量气孔开度，以检验外源ABA的作用，加深了解ABA的生理功能。

【仪器与用具】

显微镜1台（附接目测微尺）；温箱1台；感量0.001g天平；25ml烧杯6只；10ml移液管3支；剪刀1把；尖头镊子1把；光源；载玻片和盖玻片等。

【试剂】

100mg/L ABA：10μg ABA溶于100ml水中；

蒸馏水；无水乙醇；

10%醋酸纤维素丙酮溶液：称醋酸纤维素1g，加纯丙酮10ml溶解即可。

【方法】

1. ABA对小麦叶片气孔开度的影响

（1）取样 选择照光培养，生长均匀，约10天苗龄的小麦，取第一麦叶为材料，剪取长10cm切段共60段。

（2）设置处理 取6只25mL烧杯（直径尽量一致），分成三组，每组2只，按下表进行处理，即第一组每杯加蒸馏水10mL，第二组每杯加蒸馏水10ml和小麦叶片15段，第三组每杯加10mg/L的ABA溶液10mL和小麦叶片15段，均将叶片切段的基部插在溶液中。

（3）第一次称重 将上述各处理烧杯称重，记录原初重量。

（4）第二次称重 将6只烧杯放在3000lx的光源下，照光2h后再称一次重量。

（5）计算与比较 将两次称重结果分别填入表中，计算与比较三种处理的蒸发量，分析ABA对气孔开度和蒸腾的影响。

表10-1 ABA对小麦叶片蒸腾作用影响的记载表

注意事项：处理2与处理3各烧杯中插的麦叶切段尽可能一致。

2. ABA对蚕豆叶片气孔开度的影响

（1）取蚕豆倒2或倒3复叶的叶片2张，分别放入5ml蒸馏水（对照）和5ml 10mg/L ABA溶液中，每种处理设2个重复。

（2）放在3000~4000lx灯光下照光2~3h。

（3）观察（任选以下一种方法）。

A. 活体观察：用带有接目测微尺的显微镜，观察气孔的开度，测量孔径大小。

B. 剥表皮观察：用镊子撕下靠近中脉处的下表皮，立即放入无水乙醇中固定，然后放在载玻片上，盖上盖玻片在显微镜下观察测量各处理的气孔开度。

C. 印迹法：用10%醋酸纤维丙酮溶液涂在叶子下表皮，待干后取下，置显微镜下测量。

根据测量结果，分析ABA对气孔开度的影响。