掌叶防己碱的提取与分离及延胡索乙素制备

掌叶防已碱又称巴马汀（palmatine），硫酸延胡索乙素又称消旋四氢巴马汀硫酸盐（dltetrahydro palmatine sulphate）。

延胡索乙素（Corydalis B）为镇静安定药，用于缓解胃系统的疾病所引起的疼痛，临产阵痛、头痛、失眠等。

中药延胡索（元胡，Corydalis yanhusuo W.T. Wang的块根）中含延胡索乙素的量很少，而其脱氢化合物巴马汀在某些植物中含量却很高。在中国华南一带的防已科植物黄藤（Fibreursa recisa paerre）的根茎中含巴马汀，再经氢化反应，制备延胡索乙素。

黄藤曾列入《本草纲目》，李时珍谓“藤生生岭南，状若防已，但人常服此藤，纵饮食有毒，亦自然不发”。现代民间作为清热消炎药。常用于外伤感染、扁桃体炎、咽喉炎、结膜炎、热痢及黄疸等。

实验的目的要求：

1．掌握季铵生物碱的一种提取方法。

2．掌握生物碱的一般理化性质及其结构与性质的关系。

3．了解黄藤生物碱的结构与性质的关系。

4．熟悉生物碱沉淀反应的条件和方法。

5．掌握制备生物碱结晶性盐的方法和精制。

6．掌握四氢巴马汀的制备方法。

黄藤中已知成分的理化性质：

黄藤根茎及根中所含成分主为巴马汀。尚含少量药根碱、黄藤素甲、黄藤素乙、内脂及甾醇。又谓在根茎、根及树皮中含小檗碱。

1． 掌叶防已碱（巴马汀，Palmatine）

本品系季铵生物碱，溶于水、乙醇，几乎不溶于氯仿、乙醚、苯等溶剂，掌叶防已碱盐酸盐即氯化巴马汀（palmation Chloride）C21H22O4N ·Cl·3H2O为黄色针状结晶，熔点205℃（分解）。其理化性质与盐酸小檗碱类似。巴马汀氢碘酸盐（palmatine icdide）C21H22O4N·I·2H2O为橙黄色针状结晶，熔点241℃（分解）。

2．药根碱（雅托碱·Jatrorrhizine）

本品系具酚羟基季铵盐，其理化性质与巴马汀类似，但较易溶于苛性碱液中，其盐酸在水中的溶解度亦比盐酸巴马汀为大，可籍此性质予以分离。药根碱盐酸盐（Jatrorrhizine Chloride）C20H20O4N·Cl·H2O为铜色针状结晶，溶点204~206℃，其苦味酸盐（Jatrorrizine picrate）C20H20O4N·C6H2O7N2为橙黄色柱状结晶，溶点217~220℃（分解）。

3．小檗碱（黄连素Berberine）

4．四氢巴马汀（Tetrahydropalmatine）:

延胡索乙素为消旋四氢巴马汀，系叔胺碱，其游离碱C21H25O4N溶点146~148℃，不溶于水，能溶于热乙醇（在冷乙醇中溶解度较小），易溶于氯仿、苯、乙醚中，延胡索乙素的酸性硫酸盐为无色针状结晶，溶点245~246℃，在冷水中溶解度较小，在热水中较大，其中性硫酸盐为长柱状结晶，熔点220℃，在水中溶解度较酸性硫酸盐为大，其盐酸盐难溶于水。
 

 

左旋四氢巴马汀即颅痛定（Rotundine）熔点141~142℃[α]D16-257.5℃（C=1.1氯仿）。本品在华千金藤（Stephania sinica Diels）及圆叶千金藤（S. rotundalour）的块根（山乌龟）中含量较多。

 

巴马汀提取及延胡索素制备的方法

巴马汀为季铵生物碱，溶于水和极性大的有机溶剂（如甲醇、乙醇等）所以可用甲醇、乙醇或水进行提取。然后通过盐析，降低其在水中的溶解度而沉淀，与其它杂质分离。巴马汀是有机碱，尽管它带正电荷，但和水的亲和力仍小于NaCl，NaCl和水的强亲和力，降低了巴马汀在水中的溶解度，使它被“挤”出。

 

巴马汀盐酸在冷水中溶解度小（比盐酸小檗碱略大）可以利用此性质进行分离。

方法：（一）

 

2．工艺

（1）浸出：取黄藤粗粉100g，用1%醋酸冷浸（以浸没原料为度，约500ml）1~2天，尼龙布过滤，药渣再加15醋酸冷浸一天，合并滤液（留取1ml作生物碱定性反应）。

（2）盐析、中和：滤液用40%NaOH液调节至pH9同时加入7%精制食盐，即有黄色不溶物析出，80℃保温，使沉淀凝聚，静置，倾出上层清液，用菊形滤纸过滤，得巴马汀游离碱粗品，烘干。

（3）精制：将粗巴马汀，加80%乙醇100ml，加热回流使溶，约十分钟，乘热抽滤，残渣再加少量乙醇同法处理一次，抽滤最后用滴管取乙醇淋洗布氏漏斗上不溶物，合并滤液并向滤液中滴加6N盐酸至PH2放置，即有金黄色针状结晶析出，抽滤，再用乙醇重结晶一次，方法，将氯化巴马汀粗晶置三角烧瓶内，用滴管加入95%乙醇使结晶恰溶解（在水浴上加热），抽滤得澄清液，加塞放置析晶。若滤液在抽滤时已析出结晶，可将它在水溶上加热结晶全溶再加瓶塞放置，这样析出的晶形好。若滤液体积太大，可溶缩至瓶壁边沿略显固体时加塞析晶。母液适当浓缩，又可析出一部分氯化巴马汀。

（4）还原：取氯化巴马汀精制品1g。置50~100ml园底烧瓶中加蒸馏水10ml，浓硫酸0.5ml，锌粉0.7g（工业生产应分批加入锌粉），直火加热保持沸腾，反应4~5小时（反应过程加溶液颜色逐渐变淡直至无色），反应完毕，趁热倾出上层清液，再用蒸馏水少许（1~2ml）稍加热洗涤反应瓶及锌渣1~2次，合并溶液放冷即有延胡索乙素酸性硫酸盐析出。抽滤，取结晶置25ml锥形瓶中，用70%乙醇10ml加热溶解。趁热抽滤，再用少量乙醇（1~2ml）洗涤容器，向热溶液（约60℃）中滴加氨水至PH9，立即析出鳞片状结晶，抽滤，用蒸馏水洗（此处所得结晶加水能否溶解？加氯仿能否溶解？）干燥得延胡素乙素游离碱。烘干。

（5）成盐：称取延胡索乙素游离碱0.5克。置于25毫升锥形瓶（或小烧瓶）中加90%乙醇4毫升，在水浴上加热使溶解，用粗毛细管滴加5%硫酸乙醇液至刚果红试纸呈淡蓝色（PH约5）放冷析晶。将微黄柱状结晶，抽滤干50℃以下干燥，即延胡索乙素中性硫酸盐。可用水重结晶一次，干燥后测熔点。溶点——   ℃，得率——。

 

以醋酸水小样提取，一般得率1~2%，用乙醇回流浸取得率3~4%，取黄藤粗粉100g，用95%乙醇回流浸取三、四次合并乙醇至约120ml，即可按（3）精制项下操作，加盐酸得氯化巴马汀。

 

3．提取工艺说明

（1）黄藤中含有多糖类物质溶于水，往往影响水浸液盐析及中和后的过滤，故宜在静置后先倾泻去大部分澄清液再用布袋过滤收集沉淀，原料药材亦不宜粉碎太细。

（2）氯化巴马汀为金色针状结晶，并有强烈的黄色萤光。四氯巴马汀为先无色片状结晶，不具萤光。因此，反应液的颜色可作为还原终点的判断。还原开始时，反应液为橙黄色，随着还原反应的进行，反应液的色逐渐退去，至淡米色或无色即可作为反应的终点。

（3）四氢巴马汀较易氧化成巴马汀，所以制备过程中应尽快连续操作。

（4）四氢巴马汀的盐酸盐及酸性硫酸盐在水中的溶解度较小，故一般制成水溶性较大的中性硫酸盐，供配制注射剂使用。