滤器的使用
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1.针头滤器的使用
丁香园网友heyj的观点为：用滤膜孔径为0.22um的一次性针头滤器过滤胰酶，一次可以过滤100ml。如果想一次性过滤完可以准备1-2个备用的。注意在配胰酶溶液时尽量完全溶解，否则未溶的颗粒会堵住滤孔影响过滤速度。本人认为过滤效果与滤过的液体量无关。
丁香园网友ssl3304的观点为：过滤0.25的胰酶，一次可以滤1L，没有问题的，培养基最多300-400ml，总之一定要充分溶解后再过滤。
丁香园网友shaoqianqian的观点为：滤200ml培养液足够了，可是不能滤加血清的，血清太粘，滤不动的，过滤时装液体的针筒就是普通注射器。
丁香园网友dongwp的观点为：为节约起见，可以先用滤纸粗滤，再用针头滤器过滤。既节省了滤器，还提高了过滤速度。
2.国产一次性滤器的使用
丁香园网友lclhw的观点为：可以用来过滤除菌，没有问题，之前在细菌培养时用过，如果是用于动物细胞培养当然要求高些，但如果纯粹从除菌的角度说，应该没有任何问题。过滤除菌主要起作用的不就是滤膜吗？至于阻力上的感觉，那应该是加工方面的差距吧。至于需不需要或能不能够高压灭菌厂家应该给一个说法吧？如果是无菌包装的，就不需要吧。
丁香园网友snowjuan的观点为：肯定能用，我们经常那这种滤器来过滤胰酶等等。用之前洗干净，然后用双蒸水冲几遍或泡一下就可以用了，高压之前把滤膜安好，安滤膜很重要，一定不要让液体从周围漏出来，放滤膜的时候可以用双蒸水打湿一下，这样更服帖。安好以后用注射器推一推，有一定的阻力就对了。
当然这个阻力不是大到推不动，只要感觉有阻力就可以了。高压的时候把滤器拧松，高压完了以后不要高温干烤，以免把滤膜烤脆了，用的时候一拧就破了。用之前把滤器拧紧就可以了。
丁香园网友维比艾的观点为：大都用在HPLC的，目前没有听说过用在除菌的，要用这种过滤器的话用了还不如不用，他们在生产过程中的操作会有很多萃取物，反而对液体造成污染！而国产的膜是可以在自己处理过后用来除菌的，一般用两张滤膜，孔径一大一小这样可以保护滤膜本身的张力结构不会发生变化而使滤膜孔径变大！
如果考虑到经费少的问题可以买可换膜的滤器，可以反复使用的！现在国产的滤器中JET的是可以的，他们用是MILLIPORE的膜，相对进口产品性价比高些！
3.怎样正确使用国产的可重复用小滤器
丁香园网友bengbu_bli的观点为：
（1) 新买的国产滤器（使用最多是直径25mm一种，直径50mm 使用较少，效果似乎更差）使用前，要检查滤器和滤板的边缘和平面有没有毛刺，或不平整的地方，如有，设法磨去，使之光滑。
（2)将滤膜（醋酸纤维薄膜，上海医药工业研究所产品）用dH2O浸湿，选0.45um和0.22um均可，如果不放心，可以先放0.22um，再放一张0.45um在上面；有些滤纸可以看出正反面， 一般是将有光泽的一面作为正面，应朝上，即液体进入的一方。多数情况不分正反面，未发现有明显差别。
（3)放滤膜时，注意要放平整，不要偏在一边，拧上上盖时，滤器应处于水平状态，拧上盖动作要轻缓，这两点可防止滤膜移动偏离，另外需要适度拧紧。
（4)每个滤器用牛皮纸单个包装，放入铝/不锈钢/微波冻存盒、然后常规高压蒸气灭菌。
（5)使用时，注意无菌操作，在打开牛皮纸包装，取出时， 特别是滤器出口部分需保证绝对无菌。
（6)用注射器抽取待过滤液体，装在滤器进口上，先轻轻推一点点液体，使滤膜湿润，然后梢用力推进，一般情况下，如果不是粘稠液体，阻力不大，一个滤器通常可以过滤10mi左右或更多。
（7)【最重要的就在这一步】，过滤完液体后，必须检查刚才过滤的滤器是否有泄漏，方法是：
用注射器抽几毫升空气，重新装在滤器进口处，注入空气， 这时就会感到空气反而不能通过滤器，稍一松手，注射器内芯就会弹回，这就说明滤器和滤膜没有泄漏， 刚才过滤液体可以认为是无菌的。
如果注射空气时，没有阻力，注射器内芯可以压到底，那就说明有泄漏，这时拧开上盖，检查滤膜，总可以发现泄漏原因：
这时候，液体就要重新过滤，所以一般可能要多准备几个滤器以备选用。
（8)用过的滤器，去掉滤膜（不应再用），自来水冲洗2-3次后，用蒸馏水冲洗2-3次，烘干或晾干后以备下次使用。
4.使用进口可重复用滤器除菌过滤培养液
丁香园网友bengbu_bli的观点为：
多年前（80年代）刚开始做细胞培养时，使用的是G6型玻璃滤器用于除菌过滤培养液，使用前必须经过泡酸，自来水清洗，蒸馏水过滤，然后再包装，高压灭菌后用于过滤培养液。
到90年代初期，用过正压过滤型的不锈钢滤器，在滤器上下部分之间加上一张滤膜，包装，高压灭菌后，即可用于过滤培养液，比较方便。
近几年来，许多实验室已经可以使用进口的一次性过滤器，更加方便了。但估计大多数实验室还是不太可能有很多钱买这种一次性除菌滤器。我们这几年一直用一种进口的可重复用塑料滤器用于培养液的除菌过滤，使用几年下来，感觉特别方便：
滤器： Nalgene公司的Reusable Bottle Top Filter Unit
Cat.No. 320-2533 (滤器容积250ml, 适合瓶口口径33mm),我们使用就是这个规格的滤器。价格在￥1000左右。
其他规格产品编号：
320-2545(250ml, 适合瓶口口径45mm)
320-5033(500ml, 适合瓶口口径33mm）
320-5045(500ml, 适合瓶口口径45mm）
滤膜：Pall 公司产品，孔径0.22，圆形滤膜，直径47mm；也用国产的滤膜，孔径0.22， 或0.45 ，圆形滤膜，直径50mm；
滤瓶：须购置进口的，原先购买GIBCO的，现在从Sigma公司购买：
培养液瓶：Teflone-line cap, 瓶口直径：33mm；
500ml（Cat No：Z36,488-6),
250ml（Cat No：Z36,488-8)，
125ml（Cat No：Z36,488-8)。
这种滤器可以分拆成不同部件，用蒸馏水清洗后，放上滤膜，组装，注意，有一个用于连接过滤器和负压泵胶管的白色接头，必须塞入适当的棉花，必须同时安装在滤器上（其作用是在抽滤结束时防止混有细菌的外界空气突然毫无阻挡地进入过滤瓶内），然后用纱布/棉布以及牛皮纸将整个滤器包扎妥当，常规高压蒸气灭菌（121度，20分钟），使用完后立即清洗，烘干，以备下一次重复使用。
我们用这种滤器配合带螺旋口的培养液滤瓶，采用用负压抽滤过滤培养液。一般放一张滤膜（0.22或0.45)， 或者两张（0.22上面再放一张0.45)。虽然该滤器一次只能存放250ml，但一般至少过滤1000ml。
在过滤前，在滤膜上再放 1张或2张普通滤纸，则可以减轻堵塞现象，一般可以过滤2000ml培养液。
虽然没有使用过，但这种滤器的结构可用于正压过滤，因为这种滤器有一个可密封（带有硅胶垫圈）的盖子，盖子上有可以连接正压泵胶管的进气口，那样的话，也就不一定非要用瓶口带螺旋的培养瓶了。
5.李晶教授提供：小滤膜滤器使用
台朌蓝/胰酶/双抗配制/血清灭活/小滤膜滤器使用(虽简单，但重要 )
（1）2%台朌蓝工作液配制
称取4g台朌蓝加双蒸水100ml，研磨溶解，离心后取上清。然后，与1.8%氯化钠1:1稀释，配成2%台朌蓝工作液。台朌蓝有效使用浓度为0.2%～4%，用于计数细胞可使用较低浓度。检查细胞活力时，取1滴细胞悬液加1滴2%台朌蓝工作液，3～5分钟后观察。
（2）0.25%胰酶-0.02%依地酸二钠（EDTA）配制
用GMF-PBS（PH7.2）配制0.25%胰酶-0.02%依地酸二钠（EDTA）
（3）双抗配制
青霉素：用培养液8ml稀释，备用。链霉素：用培养液10ml稀释，备用。保存：4℃或－20℃保存。
（4）血清灭活
从冰箱中取出血清瓶，放入装有清水的盆中，放入4度冰箱中自然融化；
融化后尽快把血清瓶放入56℃水浴中，水面超过血清面约1～2cm；
每5分钟晃动血清瓶，摇匀血清。灭活30分钟后，取出血清，放入冷水浴中复温。冻存于-20℃或分装后冻存。
注：血清必需先经灭活补体后才能使用。血清在-20度可保存1～2年。
（5）用小滤膜滤器过滤液体除菌
小滤膜放入去离子双蒸水中，煮至沸腾。取出滤膜，装入小滤器中，扭紧后再松开一圈。高压蒸气灭菌，其后自然干燥。
使用前先拧紧小滤器，10ml注射器接上小滤器上口，加入2ml待滤液体，推上针芯，并保留数毫升气体。推压针芯，液体滤尽后，继续适当用力推压，针芯有弹性并不能将气体推尽，则表明此滤器滤膜是安装完好的。
正式过滤待滤液体。滤完后再次推空气，如有阻力，表明过滤过程中滤膜保持完好。打开小滤器，再次检查滤膜是否完好。如果发现滤膜破损，应重新过滤。
注：
小滤膜器使用方便，适于少量液体过滤；
有些有机物质（如DMSO）可溶解滤膜，因而不能使用；
市场上有成品出售，可直接应用，但仍应在过滤前后用推注气体的方法检测滤膜是否完好；一些大分子蛋白质可以粘在滤膜上，损失很大，可以先用少量血清或蛋白质冲洗一下滤膜，可减少这种损失。
6.请问CORNING一次性滤器的使用
丁香园网友Goodluck_XD的观点为：用二向出口直接进行两组过滤,是否对于每组的负压就是原来的一半,但是说远远大于,我想这个方法就行不通,用于过滤. 如果有可以测量负压的仪器,也可以用两个空气阀先试试看,看在一个空气阀中的流量对另一个的影响。
7.针筒式滤器与膜的安装
丁香园网友cosmosci的观点为：小的针式过滤器（直径为25mm\33mm规格）在使用或检测的时候压力为75psi 相当于4.5KG的力大小，不要用力过大，不然容易让滤膜变形，在使用中就失去了效果；检测时用力均匀。
