互联网2013-11-13
实验原理
核酸分子中的碱基集团含有共轭双键，它们对紫外光有强烈的吸收。核酸的最大吸收波长在260 nm，吸收低峰在230 nm。
可以利用核酸的这一特性对其浓度进行测定。在波长260 nm下，A260=1时，双链DNA的含量为50 µg/ml，单链DNA为 33 µg/ml ，RNA为 40 µg/ml，寡聚核苷酸为 20～30 µg/ml。测出核酸溶液在A260的值，即可得出浓度。
根据经验数据，纯得DNA A260/A280=1.8,纯的 RNA A260/A280=2.0.若样品中含有蛋白或其它杂质会使其比值下降。
实验试剂
TE缓冲溶液
实验设备
紫外分光光度计
实验材料
DNA
实验步骤
1、开机，选择波长
2、选择A档，调零
面表上有4个可供选择的模式，本实验选择测定A值，因此选择A模式。待测核酸为水或TE溶液，选择水或TE做空白对照进行调零。
3、测定样品
4、计算样品的浓度
双链DNA浓度=50µg/ml×A260×稀释倍数
单链DNA浓度=33µg/ml×A260×稀释倍数
单链RAN浓度=40µg/ml×A260×稀释倍数
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