植物组织汁液浓度的测定
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植物细胞汁液的浓度与植物的水分代谢、生长、抗性及果蔬品质等有关。当植物缺水时,叶肉细胞汁液浓度增高,因此可作为灌溉生理指标。
细胞汁液浓度大时,植物生长速度减慢而且抗性增强。果实、蔬菜中糖酸等溶质的含量也可用细胞汁液浓度表示,称为可溶性固形物,是果蔬品质的重要指标。本实验采用折射仪或手持糖量计的方法测定细胞汁液浓度。
【原理】
溶液的折射率与溶液浓度有密切关系。溶液浓度越高,折射率越大。对于单一溶质的溶液,可由折射率直接查出溶液浓度。溶液的折射率可以用折射仪或手持糖量计测得。手持糖量计是特为测定甘蔗或甜菜的含糖量而设计的折射仪,可直接读出汁液含糖量的百分率(无折射率标尺)。
由于甘蔗、甜菜榨汁中的溶质以蔗糖为主,其他种类溶质(如无机盐等)数量很少,由这部分溶质产生的折射率一并计入蔗糖浓度中去。
用折射仪或手持糖量计测量果实汁液浓度时,由于果汁中除糖以外含酸量也很可观,所以测得数值实际上是糖、酸两部分(及其他少量物质)的总和,常以“可溶性固形物”表示之(不溶解物质对溶液折射率无影响)。
【仪器与用具】
阿贝折射仪或手持糖量计;榨汁钳;温度计;擦镜纸适量;滴管(带橡皮头);纱布适量;打孔器。
【方法】
1. 选用田间生长的作物叶片,或多汁果实如葡萄、苹果、番茄、西瓜和甜菜块根等为试验材料。
2. 材料处理 待测植物如为多汁大型果实(如苹果)、块根等,可将表面泥土拭净,用打孔器在待测部位打出圆柱状组织,切下适当小块置榨汁钳上榨汁。小型多汁材料直接榨汁即可。如准备测定植物叶片汁液浓度,最好在田间进行,用纱布将待测叶片上尘土擦净,取下后迅速将叶片折叠成方块状,置榨汁钳上榨汁。
3. 用小滴管取一滴汁液,滴在折射仪棱镜的毛玻璃面上,关闭棱镜读出折射率或相当于糖浓度的百分率。进行下次测定时,必须用蒸馏水将棱镜上汁液洗净,再用擦镜纸擦干。
4. 取相同部位叶片或大型果实的相同部位,重复测定3~4次,记录结果。比较不同条件或不同植物不同部位的细胞汁液浓度。
【注意事项】
1. 果实不同部位所含可溶性固形物不同,所以对于大型果实,需要固定取样部位,也可将整个果实榨汁混匀测定。
2. 含水量较低的器官直接榨汁有困难,可包在薄膜中置﹣30℃以下的低温冰箱中冷冻3h,取出融解,即可榨出汁液。
3. 溶液折射率受温度影响很大。若需精确测定,应使用阿贝折射仪,并将超级恒温水浴与折射仪上保温水接口相联接,利用恒温循环水控制折射仪棱镜温度。最好将温度调到20℃。
【附注】
1. 阿贝折射仪使用方法 根据光学原理,当光线从某种透光介质射入密度不同的另一介质时,其方向即发生改变,这种现象称为折射或折光,入射角正弦与出射角正弦之比称为折光率或折光系数。折光系数视介质的种类及浓度而异,亦随温度而变化,因此在同一温度之下,可以鉴别不同物质或同一物质的不同浓度溶液。
图3-1 阿贝折射仪
1.望远镜 2.标尺镜 3、4.棱镜 5.转动螺旋 6.反光镜
7.补偿棱镜调节器 8.温度计 9.校正螺丝 10、11.通水保温设备
使用时把仪器放在光亮处,调节反光镜及5、7两部分,使望远镜中光线明亮,打开棱镜3,滴上测定液2~3滴,重新关紧使溶液在棱镜3、4 间成一薄层,此时望远镜视野当中可看到明暗不同的二个半圆,调节7,消除因色散而产生的虹彩,只余黑白二色,再调节5,使明暗交界线正通过十字交叉线的交点,如图3-1B,此时如觉十字线不清晰,可转动望远镜上的目镜,至清晰为止。然后从标尺中读出折光系数或相当于含糖量的百分数,如图3-1C。查表3-1求出20℃含糖百分率,如温度不是20℃,则应查表2加以校正。
2. 手持糖量计使用方法
手持糖量计的设计原理与阿贝折射仪相同,为了测糖溶液时的方便,读数标尺上只标出溶液折光率相当于蔗糖浓度的百分率,而无折光率的标度,用于快速检验糖料作物榨汁的浓度。
表3-1 根据20℃时折光系数测定糖液中含糖量的百分数
表3-2 温度不为20℃时折射仪的读数校正数
如测定温度不是20℃,则应查表加以校正。计算方法是在原有读数上,加入(或减去)温度修正值,见表3-3。
表3-3 手持糖量计读数之温度修正表