植物脱毒

1. 植物材料

马铃薯块茎

2. 实验程序

2.1 材料预处理

a. 选取生长正常，无病虫害危害的马铃薯块茎，在自来水下冲洗干净，漓干；

b. 取一只磁盘，将几层纱布浸湿垫在盘底，将块茎摆在其中，再覆盖浸湿的纱布，然后置于25-27℃黑暗下；

c. 待块茎芽眼萌动，顶芽大约5mm长时，除去覆盖的纱布，将其移入光照生长箱中，其中光照强度为3000~4000 lx，光照时间每天16h，气温白天约为36℃，夜间约为33℃；

2.2 茎尖剥离与培养

a. 经过6周的热处理之后，切取适当长度的芽，按照外植体灭菌方法灭菌。

b. 将双筒解剖镜置于净化工作台上，用75%乙醇将载物台擦洗干净，并用紫外灯照射20min.；

c. 取一无菌培养皿，将灭菌后的芽置于培养皿中，然后置于解剖镜载物台上，左手用镊子固定和调整芽的位置，右手持解剖刀，在解剖镜下将茎尖解剖只剩下2个最幼小的叶原基时，切下茎尖（300-600μm长），接种在含有0.2mg/L BA和0.1mg/L NAA的MS培养基上，在24℃，每天16h光照的条件下培养；

d. 当茎长到3cm甚至更长并已生根时，即可切段繁殖，每一个茎尖的植株单独编号繁殖；