影响尿生成的因素
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[目的和原理]
[实验对象] 家兔。
[实验器材和药品] MS2000生物信号记录分析系统、血压换能器、保护电极、记滴器、恒温水浴、哺乳类动物手术器械一套、兔手术台、膀胱漏斗、注射器、酒精灯、试管架、50%葡葡糖溶液、生理盐水、肝素生理盐水、25%氨基甲酸乙酯溶液、1:10000去甲肾上腺素、速尿、班氏试剂。
[实验步骤和观察项目]
一、麻醉与固定:耳缘静脉注射25%氨基甲酸乙酯(4ml/kg),待动物麻醉后仰卧位固定于兔台上。
二、手术:
(一)颈部手术
l.沿颈部正中切开皮肤,分离左侧颈总动脉,按常规将充满肝素生理盐水的动脉插管插入其内,通过血压换能器连至记录装置,描记血压。
2.分离右侧迷走神经,穿线备用。手术结束后,用温生理盐水纱布覆盖创面。
(二)腹部手术:尿液收集方法选择膀胱导尿法。
自耻骨联合上缘向上沿正中线作4厘米长皮肤切口,再沿腹白线剪开腹壁及腹膜,找到膀胱,将膀胱翻至体外。再于膀胱底部找出两侧输尿管,认清两侧输尿管在膀胱开口的部位。小心地从两侧输尿管下方穿一丝线,将膀胱上翻,结扎尿道。然后在膀胱顶部血管较少处剪一小口,插入膀胱漏斗,用线结扎固定,漏斗口应对着输尿管开口处并紧贴膀胱壁。膀胱漏斗另一端用导管连接至记滴器。
三、 仪器 连接及参数设置(MS2000)
(一)将压力换能器接在2通道,尿滴记录线接至3通道。设置相应通道并调零。
(二)刺激器设成"连续刺激",串间隔10ms,强度3.0v,波宽1ms,波间隔10ms,串长1。
(三)若尿滴有明显的漏记现象,可加快显示速度,然后选择适当的“横向压缩”调整显示。
四、观察项目
(一)记录一段正常血压曲线和尿液滴数。
(二)耳缘静脉注射38℃生理盐水15~20ml,观察血压和尿量的变化。
(三)静脉注射l:10000的去甲肾上腺素0.2~0.3ml,观察血压和尿量的变化。
(四)取尿液2滴至装有lml班氏 试剂 的 试管 中,在酒精灯上加热作尿糖定性试验。然后静脉注射38℃的50%葡萄糖5ml,观察尿量的变化,当尿量明显增多时,再取尿液2滴作尿糖定性试验。
(五)结扎并剪断右侧迷走神经,用中等强度的脉冲电流刺激其外周端20~30s,使血压降至50mmHg左右,观察尿量的变化。
(六)静脉注射呋塞米(5mg/kg),观察尿量和血压的变化。[注意事项]
1.实验前给兔多喂菜叶,或用橡皮导尿管向兔胃内灌水50ml,以增加基础尿量。
2.注意术中不要挤压膀胱。