毛细管电泳技术
互联网
毛细管电泳技术也称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)。是从传统电泳发展而来的新型高效的分析分离技术。1967年Hjerten最先提出区带电泳。1974年Virtanen提出用200~500µm内径的毛细管作电泳分离。1981年Jorgenson和Lukace首先提出在细管径毛细管内进行电泳。
1 原理
毛细管电泳的基本原理是:缓冲液中不同带电离子在高压(10~30KV)电场作用下,以石英毛细管为分离痛道,被分离物以不同的速度迁移而达到分离的目的。
2 实验流程
制备样品→选择适当的试验程序→清洗毛细管→更换电泳缓冲液进行电泳→同时在线检测
3 特点
优点:分离操作时间短,最快可达几秒;分离效率高;样品用量少,容剂消耗少,环境污染小;操作自动化程度高,可用计算机控制实现软件分析。
缺点:制备能力差;由于毛细管电泳采用内径极小,而只能进行微量分析;不能对多个样品进行平行处理,而只能对单个样品进行多次进样分析,缺乏平行对照,这要求很高的重复性。
4 应用
毛细管电泳技术可应用于:无机及有机化合物的分离分析;蛋白质、氨基酸、肽的分离分析;核酸的分离分析;对映体的分离分析;CE在药物及临床分析中的应用。
目前,毛细管电泳应用于作物贮藏蛋白研究中具独特优势,特别是在品种及种质指纹图谱构建,优质蛋白质亚基的快速鉴定、筛选与品质改良,以及目的基因的分离、克隆与鉴定等方面具有广泛的应用前景。