酶免疫电泳技术

抗原与抗体在琼脂糖凝胶中电泳时，在碱性缓冲液的条件下，抗原带负电，向正极移动。不同分子量或还不同电荷的抗原，在相同条件下，移动距离不等。这些在不同部位的抗原，再与相关抗体经扩散形成免疫沉淀线。酶免疫电泳技术中的抗原与抗体就是酶和它的相应抗体球蛋白。酶抗原与酶抗体形成的免疫复合物是用底物显色的，由于酶反应的高度灵敏性，使酶免疫电泳技术成为一项灵敏度高的检测技术，但仅局限于酶蛋白的分析鉴定。

2.在穴槽一端的两侧近边沿2mm处各打一小孔（直径2——3mm），在一孔穴中加入健株叶片汁液，在另一孔穴加入感染病毒的植株叶片汁液。

3.加汁液的孔穴一端接负极，电泳缓冲液仍是0.1mol/LpH8.6巴比妥钠盐酸缓冲液，电压150V，电泳1h。

4.在穴槽加入抗HRP兔血清，置于湿盒中，在37℃温箱中反应3h左右或室温过夜。

5.在生理盐水中浸洗3——4天，每天换水3次。

6.敷上干净的湿滤纸，置于40℃烘箱内烘干。

7.浸入底物显色，从沉淀弧的形状，部位不同，比较健，病汁液所形成的沉淀线。

1.阳性反应：在抗原抗体孔之间呈现明显的棕红色的线条。

2.阴性反应：不出现棕红色线条者。