细胞性免疫原的制备
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细胞性免疫原主要是指人、动物、微生物或寄生虫的细胞。
一、绵羊红细胞的制备
绵羊红细胞是制备溶血素的免疫原,制备时采健康绵羊的颈静脉血,立即注入无菌有玻璃珠的三角瓶内,经充分摇动15~20min,以去除纤维蛋白,获得抗凝绵羊全血。另外,也可将全血和Alsever液以1:2混合,Alsever液既能起到抗凝作用又能起到保护作用。全血与Alsever液充分混合后,置4℃保存可使用3周左右。
免疫前取适量抗凝血于离心管中,用无菌生理盐水洗细胞2~3次(每次2000rpm,10min)。取压积红细胞,用无菌生理盐水稀释至2%~5%,即可用于免疫注射。
二、以制备菌体(O)抗原为例
选用经鉴定合格抗原性完整的标准菌株,接种于琼脂斜面培养基,置温箱37℃培养24h增菌;用适量生理盐水洗刮下菌苔,移入含有无菌玻璃珠的三角瓶中,充分摇动混匀菌体;100℃水浴2~2.5h杀菌并破坏H抗原。将处理过的菌液检测有无活菌存在,合格后用生理盐水稀释成每毫升8亿~10亿菌,加入石炭酸至终浓度为5%,即为O(菌体)抗原。