实验78 肾上腺皮质与机体对有害刺激耐受力的影响

实验78 肾上腺皮质与机体对有害刺激耐受力的影响

　　【目的要求】

　　1．学习用摘除法造成功能缺损，以了解研究内分泌腺功能的方法。

　　2．观察肾上腺皮质激素对机体的水盐代谢及应激能力等方面的作用。

　　【基本原理】

　　肾上腺皮质是维持生命所必需的。肾上腺皮质释放盐皮质激素、糖皮质激素和少量性激素。糖皮质激素参与体内糖、蛋白质和脂肪的代谢调节，并能增强机体对有害刺激的耐受能力；盐皮质激素则参与水盐代谢的调节。摘除肾上腺的动物可迅速表现出肾上腺皮质功能失调的现象，例如食欲下降，低血压、肌无力和肾衰竭等，同时也表现出抗炎症、抗过敏能力下降及对有害刺激的耐受力下降。

　　【动物与器材】

　　成熟的雄性大白鼠（或小白鼠）20只、常用手术器械、小动物手术台、台秤、酒精棉球、注射器、鼠笼、生理盐水、乙醚、1%NaCl溶液、75%酒精。

　　【方法与步骤】

　　1．动物的分组和手术

　　（1）动物的分组选择健康而体重相近（150g左右）的雄性大白鼠20只，称重和编号，分为4组，每组5只。各组动物的体重和健康情况应大致相似。第1、2、3组动物为摘除肾上腺的实验组，第4组为正常对照组。

　　（2）肾上腺摘除术用乙醚麻醉大白鼠，腹位固定于小动物手术台上。剪去动物背部的被毛，用75%酒精消毒手术部位和手术者的双手。手术器械也应用75%酒精浸泡10min。

　　在背部正中线作一长约3cm的皮肤切口，用镊子夹住皮肤边缘，将切口牵向左侧。分离两侧肌肉。在左肋骨下缘将腹壁剪一约1cm切口，以小镊子夹盐水棉球轻轻推开腹腔内的脏器和组织，即可在肾的上方找到淡黄色的肾上腺，直径约2—4mm，周围被肾脂肪囊所包裹。用小镊子紧紧夹住肾上腺与肾之间的血管和组织，再用眼科剪或小镊子将肾上腺摘除。然后按上法摘除右侧肾上腺。

　　摘除肾上腺后，依次用线缝合肌层和皮肤的切口，用酒精棉球消毒皮肤的缝合口。手术后，各组动物应在同样条件下饲养。

　　对照组手术操作与实验组相同，但不摘除肾上腺。

　　2．观察项目

　　（1）肾上腺摘除对动物水盐代谢和存活率的影响手术后，第1组（去肾上腺）和第4组动物只饮清水；第2组（去肾上腺 盐水）动物饮1%NaCl溶液；第3组（去肾上腺 可的松）动物除饮清水外，每天灌服可的松两次，每次50μg。

　　连续观察一周，每天记录动物的体重、进食情况、活动情况和肌肉紧张度及死亡率等。实验结果可列表进行比较。

　　（2）肾上腺摘除对动物应激功能的影响进行这项实验的前两天，对存活的实验组（去肾上腺）动物和对照组动物都停止喂食，全部只饮用清水（即不再给予盐水和可的松）。

　　实验时，在每组中各取2只动物进行观察，比较它们在禁食2天后，在姿势、活动情况和肌肉紧张度等方面与禁食前有何变化？各组间的变化有何差异？

　　将动物移入2℃冷室中，停止给药，保证动物饮水和食物，每日观察一次，记录其死亡情况。以存活率为纵座标，日数为横座标，作图表示。

　　【注意事项】

　　1．动物应编号，以免混淆，编号的方法可用黄色的苦味酸稀溶液在背部写上号码；亦可用细铝丝穿过耳廓，悬挂一个有号码的小铝牌。

　　2．摘除肾上腺动物对有害刺激的抵抗力降低，动物应尽可能分笼单独饲养，以免互相残杀。而且要喂以高热量和高蛋白的饲料。室温最好保持在20—25℃之间。