从冻存的全血样本中快速分离出基因组 DNA
北京擎科生物科技有限公司
3044
【样品】冻存的全血样本
【样品准备】
将冻存的血液样品充分融化后混匀。
【操作步骤】
1.活化硅胶膜
将吸附柱放入收集管中,加入250 ul Buffer BL,12,000 g离心1 min,活化硅胶膜。
2.样品消化
(1)取20 ul Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 ul充分混匀的全血样品,涡旋振荡10 s。
(2)加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10 s,70℃孵育1 h,期间震荡1 ~ 2次。
3.孵育结束后加入200 ul无水乙醇,涡旋振荡混匀。
4.将步骤3所得溶液全部转入吸附柱中,12,000 g离心1 min,弃废液。
5.向吸附柱中加入500 ul Buffer PW,12,000 g离心30 s,弃废液。
6.重复步骤5一次。
7.向吸附柱中加入500ul Wash Buffer,12,000g离心30 s,弃废液。
8.将吸附柱放回收集管中,12,000g离心2 min,开盖晾干1 min。
9.取出吸附柱,放入一个干净的1.5 ml离心管中,在吸附膜的中央处加50 ul TE Buffer,室温放置2 min,12,000 g离心2 min。如果需要较多量DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心2 min。
【结果】
DNA Marker, DL5000 (TSJ012-100/500);样品1-5:全血样本。
【数据来源】
青岛大学附属医院马老师
【来自老师的评语】
以前我们用过其他公司专门提取血液基因组的是试剂盒,血液用量比较大,效果也一般,胶图背景脏;擎科这款动物基因组提取试剂盒属于通用型的,可以一盒多用这点是非常不错的,而且提取的时候血液用量少,提取效果也能满足我后续的实验要求,挺不错的一款产品。
【样品准备】
将冻存的血液样品充分融化后混匀。
【操作步骤】
1.活化硅胶膜
将吸附柱放入收集管中,加入250 ul Buffer BL,12,000 g离心1 min,活化硅胶膜。
2.样品消化
(1)取20 ul Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 ul充分混匀的全血样品,涡旋振荡10 s。
(2)加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10 s,70℃孵育1 h,期间震荡1 ~ 2次。
3.孵育结束后加入200 ul无水乙醇,涡旋振荡混匀。
4.将步骤3所得溶液全部转入吸附柱中,12,000 g离心1 min,弃废液。
5.向吸附柱中加入500 ul Buffer PW,12,000 g离心30 s,弃废液。
6.重复步骤5一次。
7.向吸附柱中加入500ul Wash Buffer,12,000g离心30 s,弃废液。
8.将吸附柱放回收集管中,12,000g离心2 min,开盖晾干1 min。
9.取出吸附柱,放入一个干净的1.5 ml离心管中,在吸附膜的中央处加50 ul TE Buffer,室温放置2 min,12,000 g离心2 min。如果需要较多量DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心2 min。
【结果】
DNA Marker, DL5000 (TSJ012-100/500);样品1-5:全血样本。
【数据来源】
青岛大学附属医院马老师
【来自老师的评语】
以前我们用过其他公司专门提取血液基因组的是试剂盒,血液用量比较大,效果也一般,胶图背景脏;擎科这款动物基因组提取试剂盒属于通用型的,可以一盒多用这点是非常不错的,而且提取的时候血液用量少,提取效果也能满足我后续的实验要求,挺不错的一款产品。