研究者更进一步地在肿瘤已消除 90 天后的小鼠中进行 MC38 细胞的二次皮下注射，发现肿瘤并未生长，表明长期的抗肿瘤免疫记忆已形成。但此免疫记忆仅适用于 MC38 细胞，其他肿瘤细胞系仍可以形成与未处理组小鼠相近大小的肿瘤。 之后，研究者从肿瘤已消退 100 天后的小鼠中分离了 CD8+和 CD4+的记忆 T 细胞。5 x 105 的记忆 T 细胞被转移到已形成 MC38 瘤的小鼠中，显示出极佳的抗肿瘤活性。这些发现证实了 L-Arg 菌株合并抗 PD-L1 免疫治疗加强了肿瘤特异性 T 细胞的免疫记忆。 虽然肿瘤内注射菌株适用于可直达病灶的肿瘤，但系统性的摄入菌株也可以定位到不可直达的肿瘤。更高剂量的菌株通过静脉注入到成瘤小鼠体内后，对于很小的肿瘤，菌株并不能完全保持在肿瘤内，但对于体积大于 100 mm3 的肿瘤，静脉注射 L-Arg 菌株也能够长期保持在原位，而其他组织没有观察到菌株生长。 随后，研究者们检测了静脉注射菌株联合抗 PD-L1 免疫治疗的治疗效率，结果显示观察到了对肿瘤生长的抑制，但仅有 40% 的小鼠能够完全根除肿瘤，这可能是由于初始的肿瘤过大，大约是之前实验的两倍。之后研究者们在其他的肿瘤模型中也测试了该生物工程改造菌株的肿瘤抑制效果，发现与 MC38 模型一致。
图片来源：Nature 综上所述，该研究通过合成生物学的手段构建了一个变异菌株，对肿瘤微环境进行了代谢物重塑。该 L-Arg 菌株疗法合并 PD-L1 阻断免疫治疗，产生了极强的依赖于 T 细胞的长期抗肿瘤免疫。 这些发现为免疫治疗提供了新的思路，奠定了在临床中使用合成生物学手段的可能性。 题图来源：站酷海洛参考文献：Canale, F.P., Basso, C., Antonini, G. et al. Metabolic modulation of tumours with engineered bacteria for immunotherapy. Nature (2021). https://doi.org/10.1038/s41586-021-04003-2
